大花酢浆草植物组织培养技术的研究解决方案.pptVIP

2.2褐化 2.2.1褐化现象：一般认为,褐化是指外植体或培养材料接种后在组织培养过程中,由于切割造成机械损伤,伤口处分泌出酚类化合物,在有氧的条件下,切面细胞中的酚类物质为多酚氧化酶催化,氧化为醌,醌再通过非酶促反应产生有色物质而导致组织褐变,变成棕褐色或暗褐色,并逐渐扩散到培养基中,抑制细胞内其它酶的活性,影响细胞的正常代谢,毒害整个组织,甚至导致组织死亡。 2.2.2解决的方法：可以在培养基内添加活性炭。它对此生代谢物有吸附作用，可以抑制褐化的。如果没有活性炭还可以通过暗培养来解决。一般接种以后，先暗培养2-3天，再接受光照，可以有效减少褐化率。 2.3玻璃化 2.3.1概念：是指试管苗呈半透明状，外观形态异常的现象。 2.3.2措施： （1）选不易玻璃化的品种及部位做外植体材料。 （2）利用固体培养基,增加琼脂浓度，选择适当的碳源，提高培养基中蔗糖含量，从根本上降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏,减少培养基中植物材料可获得的水分,因而可明显降低观赏植物试管苗玻璃 化现象。 （3）采用通气性好的封口材料如纱布、脱脂棉等代替聚乙烯塑料膜作为封口材料,可降有效低培养容器内环境的相对湿度,减轻有害气体的积累,使植物光合作用顺畅 （4）培养基中ＢＡ是导致试管苗玻璃化的一个重要原因， 选择搭配合适的激素,适当降低培养基中ＢＡ的浓度 均可减轻玻璃苗的出现。 （5）控制温度通过培养条件(温度和光照)减少玻璃苗的 发生。控制温度,避免过高的培养温度,进行变温处 理,适当低温处理可消除玻璃化，提高光照强度,适 当延长光照时间,充分利用自然光照也可以减低玻璃 苗的发生频率 。 （6）另外,在培养基中减少或除去ＮＨ4ＮＯ3，附加活 性炭、青霉素、聚乙烯醇(ＰＶＡ)、Ｃａ、赤霉素 (ＧＡ)及多效唑(ＰＰ333)等,减少继代培养的次数 等措施均可降低观赏植物组培过程中玻璃苗的发生 目 录 一、实验目的 二、实验条件 三、结果意义 四、形态特征 五、生理习性 六、技术路线 七、研究计划 八、实验步骤 九、名称溯源 十、状况防治 一、实验目的 1.研究大花酢浆草的最适培养条件(外因) 2.新品种大量栽培：由于大花酢浆草为无种子植物,所以，对其进行体细胞无性系建立的研究,是为大花酢浆草的组织培养和快速繁殖探索一条有效的途径。 3.美学价值：大花酢浆草花色鲜艳，叶片嫩绿，植株整齐，生长迅速，观赏期长等诸多优点，是难得的美化环境的园林植物。 4.商业价值：大花酢浆草只在互联网上出售种球，数量少，价格高，偶有作为盆花供人观赏，未能大量推广种植。而且尚未发现国内有对大花酢浆草研究的先例。因此，如果能够增加其繁殖速度，会产生很大的经济效益。 二、实验条件 　　　当前，本学院已经具有红花酢浆草、蔓生酢浆草紫叶酢浆草和从广州引进的大花酢浆草物种资源，实验室已经具备实验所需要的专用工具、药品和仪器设备等一切必备条件。例如：准备室、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室等都齐备，进行各项研究的条件成熟，能够进行大花酢浆草体细胞无性生殖系的研究。 三、结果意义 本实验的关键是园林植物组织培养过程，虽然现在我们的实验室条件成熟，但是一些不可避免的因素仍然可能导致实验的失败。 1.植物发生褐化：由于所取的外植体经过切 割，产生酚类的分泌物，致使发生褐化，但这是不可避免的过程。所以可以说褐化是一定会发生的。 2.试管苗发生玻璃化：试管苗玻璃化现象在组织培养中普遍存在（100%） 四、形态特征 　　大花酢浆草是为多年生草本，高10-15cm。根茎匍匐，具肥厚的纺锤形根茎，茎短缩不明或无茎，基部围以膜质鳞片。叶多数，基生；叶柄细弱，长7-10cm,被绒毛，基部具关节。小叶三枚，宽倒卵形或倒卵圆形，长1.5-2cm，宽2.5-3cm， 先端钝圆形，微凹，基部宽楔形，表面无毛，背面被疏柔毛。伞形花序基生或近基生，明显长于叶，花4-10，总花梗被柔毛，薄片披针形，被柔毛，花梗不等长，长为苞片的3-4倍，萼披针形，长10-12mm，宽4-5mm，边缘具睫毛。花瓣紫红色，宽倒卵形，长为萼片的2.5-3倍，先端钝圆，基部具爪，雄10，2轮，内轮长是轮长的2倍，花丝基部合生，子房被柔毛，花期5-8月，果期6-1月。花后休眠，无种子。 五、生理习性 　　 大花酢浆草为我国近年来引进的新品种，性喜温暖湿润和阳光充足的环境，较耐低温，但畏严寒，通常5℃以上可以安全越冬，周年观赏；较为耐阴、耐旱，忌烈日暴晒。盆土适宜用含有腐殖质丰富、疏松肥沃、排水性良好的中性或者微酸性沙质土壤；粘土不利于成长，要适当换土；它喜肥沃，不耐贫瘠。生长期放在光线充足处养护，夏季高温时植株处于半休眠状态，生长缓慢，可适当遮光，以防烈日暴晒，