放射免疫技术课堂版研讨.pptVIP

放射免疫技术 目录 放射免疫技术 1.原理及分类 2.常用的放射性核素 一 放射免疫分析 二 免疫放射分析 三 IRMA和RIA的比较 * 放射免疫技术（radiommunoassay technique） 是以放射核素为示踪物的一种免疫标记测定技术 优点：灵敏度高，特异性强，重复性好，样品及试剂用量少，操作简便易于标准化等 缺点：放射性元素污染 1.原理及分类 放射免疫 （RIA） 以标记抗原与反 应系统中未标记 抗原竞争结合特 异性抗体来测定 待检样品中抗原 量。 免疫放射 （IRMA） 以过量标记抗体 与抗原非竞争结 合，采用固相免 疫吸附载体分离 游离和结合标记 抗体。 常用的标记核素 2.常用的放射性核素 （一） 放射免疫分析 基本原理 Ab限量，Ag*定量, Ag*和Ag的量大于 Ab结合位点，二者 通过竞争方式与Ab 结合；随着Ag增加，Ag*与Ab结合形成Ag*Ab复合物的放 射量降低,二者变化 成函数关系。 以未结合的Ag*为 F，Ag*Ab复合物 为B，则B/F或 B/(B＋F)与Ag的 量变存在着函数 关系－剂量反应 曲线 注：T即是B与F的总和 （二） 免疫放射分析 Miles将放射性核素标记胰岛素抗体，用双抗体夹心检测血清胰岛素，为区别放射免疫分析法，将之称为免疫放射分析。 基本原理 单位点 IRMA 先用过量标记抗体与 待测抗原进行反应，形成 抗原抗体复合物；用固相 抗原结合未结合标记抗体 并将其分离, 测定上清液 的放射量 双位点 IRMA 先用固相抗体与抗原结 合，再用过量的标记 抗体与抗原的另一决定 簇结合，形成固相抗体- 抗原-标记抗体复合物， 洗弃剩余标记抗体，测固相上放射性。 *