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实验8 生长素、ABA植物激素的部位和浓度效应——植物激素对根/芽生长的影响 实验原理 植物激素生理效应的特异性 Auxin及人工合成的类似物质如萘乙酸(NAA)等对植物生长的调节作用, ABA抑制生长和种子萌发 Auxin的剂量效应 在不同浓度下对植物生长的效应也不同。一般来说,低浓度的Auxin促进生长,高浓度时则抑制生长。 Auxin不同器官的敏感性差异 不同的植物器官对Auxin的反应也不同,通常根比芽、茎对Auxin更敏感。 材料、设备仪器及试剂 生长素实验 材料:小麦种子 仪器:温箱、培养皿、移液管、直尺、滤纸、镊子、铅笔 药品: NAA 母液(10 mg/L NAA),0.1%升汞 ABA实验 材料:油菜种子 仪器:培养皿、滤纸、镊子、移液管、铅笔、烧杯 药品:ABA 母液( 0.1 mM ABA ) 0.1%升汞 实验步骤 (一)1. 配置浓度梯度:取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入NAA母液(10mg/L) NAA1mL,加9mL蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1mL放入2号皿中,加9mL蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号培养皿中取出1mL弃去),第5号皿则加入9mL蒸馏水作对照。 2. 排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上,使芽尖朝上并使胚的部位朝向同一侧,盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 (二)1. 取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 mL,然后从其中吸取0.2 mL放入2号培养皿中,加1.8 mL蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 mL弃去),第5号皿中则加入1.8 mL蒸馏水作对照 2. 排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜籽20粒,放入皿中后用镊子种子分布均匀,盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 1. 配置梯度浓度NAA:取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入10mg/L NAA1mL,加9mL蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1mL放入2号皿中,加9mL蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号培养皿中取出1mL弃去),第5号皿则加入9mL蒸馏水作对照。 2. 种子排列:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上,使芽尖朝上并使胚的部位朝向同一侧,盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 1.配置梯度浓度ABA:取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 mL,然后从其中吸取0.2 mL放入2号培养皿中,加1.8 mL蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 mL弃去),第5号皿中则加入1.8 mL蒸馏水作对照 2. 种子排列:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜种子20粒,放入皿中后用镊子种子分布均匀,盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 结果记录与分析(一) 分析: NAA浓度效应 器官对NAA的敏感性 对数据作统计分析(修过生物统计课程的) 结果记录与分析(二) ABA实验(培养2d后观测) 调查发芽率:胚芽(根)种子半径(露白) 作图: 将ABA 浓度作横座标,以相对发芽率(设对照发芽率为100%)为纵座标。 分析不同浓度的ABA对种子发芽率的影响. 注意事项 洁净的培养皿 选用活力一致的种子 制作浓度梯度时,摇匀后再取,由高到低稀释 平铺吸水纸 实际试验时务必设置重复 携带调查用直尺\纸笔 调查后洗净培养皿\反置 思考题 1、如何准备ABA母液? 2、在你的整个实验过程中,如果培养皿的盖子不严,有水分挥发,将对实验结果有何影响? * * 1.了解Auxin/ABA的生理效应; 2. 了解不同器官对植物激素敏感性的差异 3. 综合分析 不同浓度的生长素对根部的影响 10-11 10-9 10-7 10-5 10-3 10-1 Auxin浓度 不同营养器官对不同浓度IAA的反应 10-4 根 茎 芽 10-10 10-8 ABA对种子的萌发抑制作用 ABA对气孔的影响 1 ml NAA母液 9 ml H2O 1 ml ① 1 ml ② 1 ml ③ 舍弃1 ml④ 9 ml H2O 1 mg/L 0.1 mg/L 0.01 mg/L 0.001 mg/L 0 mg/L ① ② ③ ④
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