实验室常用技术参数试剂配方要点.doc

验室常用技术参数资料 一、核酸及蛋白质常用数据 1．核苷三磷酸的物理常数 化合物 分子量 λmax(pH7.0) 1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值 OD280/OD260 ATP 507 259 15400 0.15 CTP 483 271 9000 0.97 GTP 523 253 13700 0.66 UTP 484 262 10000 0.38 dATP 494 259 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 0.98 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 482 267 9600 0.71 2．常用核酸的长度与分子量 核酸 核苷酸数 分子量 λDNA 48502（双链环状） 3.0×107 pBR322 4363（双链） 2.8×106 28SrRNA 4800 1.6×106 23SrRNA 3700 1.2×106 18SrRNA 1900 6.1×105 19SrRNA 1700 5.5×105 5SrRNA 120 3.6×104 tRNA（大肠杆菌） 75 2.5×104 3．常用核酸蛋白换算数据　（1）重量换算 　　1μg=10-6g　　　　　 1pg=10-12g 　　1ng=10-9g 　　　　　1fg=10-15g （2）分光光度换算： 　　1A260双链DNA=50μg/ml 　　1A260单链DNA=30μg/ml 　　1A260单链RNA=40μg/ml （3）DNA摩尔换算： 　1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端 　1μg pBR322 DNA=0.36pmol 　1pmol 1000bp DNA=0.66μg 　1pmol pBR322=2.8μg 　1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿 　1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿 1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿　（4）蛋白摩尔换算： 　　100pmol分子量100，000蛋白质=10μg 　　100pmol分子量50，000蛋白质=5μg 　　100pmol分子量10，000蛋白质=1μg 　　氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 　（5）蛋白质/DNA换算： 　　1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质 　　10，000MW蛋白质=270bp DNA 　　30，000MW蛋白质=810bp DNA 　　50，000MW蛋白质=1.35kb 　　100，000MW蛋白质=2.7kb DNA 4．常用蛋白质分子量标准参照物 （1）高分子量标准参照 （2）中分子量标准参照 （3）低分子量标准参照 肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 97，400 碳酸酐酶 31，00 肌球蛋白 212，000 牛血清白蛋白 66，200 大豆脻蛋白酶 21，500 β-半乳糖甘酶B 116，000 谷氨酶脱氢酶 55，000 抑制剂 　 磷酸化酶B 97，400 卵白蛋白 42，700 马心肌球蛋白 16，900 牛血清白蛋白 66，200 醛缩酶 40，000 溶菌酶 14，400 过氧化氢酶` 57，000 碳酸酐酶 31，000 肌球蛋白（F1） 8，100 醛缩酶 40，000 大豆脻蛋白酶 21，500 肌球蛋白（F2） 6，200 　 　 抑制剂 　 肌球蛋白（F3） 2，500 　 　 溶菌酶 14，400 　 　 5．常用DNA分子量标准参照物 λDNA/HindⅢ λDNA/EcoRⅠ λ/HindⅢ+EcoRⅠ pBR322/HaeⅢ 23130 21226 21227 587 123 9416 7421 5148 405 104 6557 5804 4973 504 89 4361 5643 4268 458 80 2322 4843 3530 434 64 2027 3530 2027 267 57 564 　 1904 234 51 125 　 1584 213 21 　 　 1375 192 18 　 　 974 184 11 　 　 831 124 7 　 　 564 　 　 　 　 125 　 　 续上表 pBR322/HinfⅠ φχ174/HinfⅠ φχ174/Hae Ⅲ φχ174/TapⅠ 1631 726 140 1353 2914 517 713 118 1078 1175 506 553 100 872 404 396 500 82 603 327 344 417 66 310 231 298 413 48 281 141 221 311 42 271 87 220 249 4