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用毛细吸管吸取少量滤液 ,画线,待干燥后重复2-3次。 实验:叶绿体中色素的提取和分离 一、实验材料 二、实验原理 提取: 叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以用无水乙提取醇可叶绿体中色素。 分离: 色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。 提取色素: (1)用天平称取5克菠菜叶,剪碎,加入少许二氧化硅、碳酸钙+10ml无水乙醇。进行迅速 、充分研磨。 二氧化硅:为了使研磨充分; 碳酸钙:保护色素免受破坏; 无水乙醇:色素的溶剂。 注意防止无水乙醇挥发 三、实验步骤 (2)取单层尼龙布折叠,放入漏斗, 将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤。将滤液收集到试管中。 想一想,这里为什么不用滤纸呢 注意:收集好的研磨液及时用棉塞塞紧。 将干燥的定性滤纸剪成滤纸条,将滤纸条的一端剪去两角,并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 制备滤纸条: 其透性好,吸收滤液较多 铅笔线 画铅笔细线 剪去两角的原因? 画滤液细线: 滤液细线 画滤液细线 ★要求:细而直 重复2—3次 插滤纸条 层析液 培养皿 ★层析液不能没及滤液线 (为什么?) 分离色素: 将适量的层析液倒入烧杯中,将滤纸条轻轻插入层析液中(不要没过滤液线),用培养皿盖住小烧杯。 观察实验现象 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 实验结果 可以看出: 色素扩散距离不同。 色素带宽度不同; 三、注意事项 实验中各种用液很多有毒(丙酮、苯等)且易燃,属危险试剂,实验时保持通风,安全操作 实验注重团队合作,组员们共同完成实验。 四、实验总结 最宽(最多):叶绿素a 最窄(最少):胡萝卜素 相邻距离最近:叶绿素a和叶绿素b 色素在滤纸上自上而下分布依次为: 胡萝卜素?叶黄素?叶绿素a ?叶绿素b 色素含量最多的是:叶绿素a
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