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专题10 生物技术实践 考点31 微生物的利用及在传统发酵技术中的应用
[直击考纲] 1.微生物的实验室培养。2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。3.果胶酶在果汁生产中的作用。4.果酒及果醋的制作。5.胡萝卜素的提取。6.菊花的组织培养。7.血红蛋白的提取和分离。
考点31 微生物的利用及在传统发酵技术中的应用
1.微生物的培养
(1)无菌技术:主要包括消毒和灭菌。
①消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。
②常用灭菌方法:灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具;干热灭菌——主要针对玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。
(2)如图为倒平板操作过程,操作时要待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近进行。
制备固体培养基最后要将平板倒置,其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。
(3)平板划线操作
(4)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示:
2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(1)分离——选择培养基
①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。
②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。
③培养基中缺乏氮源时,可以分离得到固氮微生物。
④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。
⑤改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
⑥土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
(2)计数
①筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。
②计数方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性,需设置重复组,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
③过程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
(3)鉴定方法
含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素。
3.微生物在传统发酵技术中的应用
果酒制作 果醋制作 制作原理 菌种 酵母菌 醋酸菌 反应 有氧条件下,大量繁殖:C6H12O6+6O2+6H2O―→6CO2+12H2O
无氧条件下,酒精发酵:C6H12O6―→2C2H5OH+2CO2 氧气、糖源充足时:C6H12O6+2O2―→2CH3COOH+2CO2+2H2O
缺少糖源、氧气充足时:C2H5OH+O2―→CH3COOH+H2O 发酵条件 最适发酵温度 18~25 ℃ 30~35 ℃ 空气 前期:需氧;后期:不需氧 需要充足的氧气 时间 10~12 d 7~8 d
1.判断下列有关微生物的培养与传统发酵技术的叙述
(1)常用液体培养基分离获得细菌单菌落(2012·大纲全国,5B)( × )
(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011·新课标全国,39(2))( √ )
(3)测定培养液中微生物数量,可选用显微镜直接计数法计数(2010·山东,34节选)( √ )
(4)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供碳源。发酵过程中检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数(2014·山东,35节选)( √ )
(5)在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长(2012·江苏,21A)( √ )
(6)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,让发酵装置接受光照并放在45 ℃处(2010·北京,1AD)( × )
(7)在果酒和果醋制作过程中,果酒的制作过程是在缺氧条件下,而果醋整个制作过程一直处于有氧条件下(2010·江苏,7AC改编)( × )
2.(2014·江苏,24) 某同学设计了右图所示的发酵装置,下列有关叙述正确的是(多选)( )
A.该装置可阻止空气进入,用于果酒发酵
B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出
C.去除弯管中的水,该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸
D.去除弯管中的水后,该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似
答案 ABD
解析 A项,该装置中注水的弯曲部分可阻止空气进入,能用于果酒发酵。B项,果酒发酵产生的CO2可溶解在弯管的水中,CO2量多时可进一步通过水排出。C项,醋酸菌是好氧菌,因没有将无菌空气通入发酵液中,故去除弯管中的水后也不能满足底层发酵液中醋酸菌有氧呼吸的需求。D项,去除弯管中的水后,该装置的弯管部分既能排出CO2,也能防止空气中的微生物进入,与巴斯德的鹅颈瓶作用类似。
3.(2014·新课标Ⅱ,39)为了调查某河流的水质状况
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