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第七章 发酵过程控制-2014研讨
最适发酵温度是既适合菌体的生长又适合代谢产物合成的温度。 随菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段不同而改变。 * 最适发酵温度还随菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段而改变。如,在较差的通气条件下,由于氧的溶解度是随温度下降而升高,因此降低发酵温度对发酵是有利的,因为低温可以提高氧的溶解度、降低菌体生长速率,减少氧的消耗,从而可弥补通气条件差所带来的不足。 在工业发酵中多实行变温控制:在生长阶段选择适合菌体生长的温度,在产物合成阶段,选择适合代谢产物合成的温度。 一般不需加热,因释放了大量的发酵热,需要冷却的情况多。 一般情况下,将冷却水通入发酵罐的夹层或蛇形管中,进行热交换降温。 如果气温较高,冷却水的温度又高,可采用冷冻盐水进行循环式降温。 * * 不同微生物对pH值的要求不同,大多数细菌的最适pH值为6.5-7.5,霉菌的最适pH值为4.0-8.0,酵母菌的最适pH值为3.8-6.0,放线菌的最适pH值为6.5-8.0。 发酵过程中控制一定的pH值,是保证微生物正常生长的重要的条件之一,也是防止杂菌污染的一个重要措施。 pH值不仅影响微生物的生长,还会影响到代谢产物的形成。 * * Aspergillus niger:黑曲霉 * 最适pH的选择:根据不同菌种的生理特性,确定不同的最适pH值;同一菌种根据不同阶段,菌体生长期和产物合成时期分别采用各自的最适生长的pH。 pH的控制 1.采用合适的培养基配比 C:N合适,生理酸性物质和生理碱性物质比例合适; 在基础料中加入维持pH的缓冲物质,如CaCO3,或具有缓冲能力的试剂,如磷酸缓冲液等; 基础料中若含有玉米浆,pH呈酸性,必须调节pH。 2.通过补料调节pH 在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时,采用补料调pH: (1)调节补糖速率,调节空气流量来调节pH (2)当NH2-N低,pH低时补氨水; 当NH2-N低,pH高时补(NH4)2SO4 3.当补料与调pH发生矛盾时, 加酸碱调pH :在发酵过程中直接补加酸或碱。过去流加硫酸或氢氧化钠,现采用补加氨水、尿素、硫酸铵。 (1)调节好基础培养基的pH。 若控制消后pH在6.0,消前pH往往要调到6.5?6.8。 (2)通过加酸碱和中间补料来控制。 a.过去直接加酸(H2SO4)或碱(NaOH),现常用: 生理酸性物质:(NH4)2SO4 生理碱性物质:氨水 b.补料既调节了pH值,又补充了营养,还可减少阻 遏作用。 如:味精厂普遍采用流加尿素,有两个作用: 调节pH值 补充氮源 * 通气和搅拌的目的就是提供微生物生长和代谢所需的氧,并使微生物在培养液中处于悬浮状态以及提高代谢产物的传递速度。 一、发酵过程溶解氧浓度的变化 对多数发酵来说,氧的不足会造成代谢异常,产量降低。溶解氧最易变为发酵中的主要矛盾。 只有了解发酵过程中溶解氧浓度的变化,才能有效地控制发酵的进行。 如金霉素发酵,在生长期中短时间停止通气,就可能影响菌体在生产期的糖代谢途径,由磷酸戊糖途径转向糖酵解途径,使金霉素合成的产量减少。 1、临界氧浓度 临界溶氧浓度:当培养基中不存在其他限制性基质时,不影响好氧性微生物生长繁殖的最低溶解氧浓度称为临界氧浓度。 而微生物发酵的最适氧浓度与临界氧浓度是不同的。 最适氧浓度:溶解氧浓度对生长或产物合成的最适的浓度范围。 为了避免发酵处于限氧条件下,需要考查每一种发酵产物的临界氧浓度和最适氧浓度,并使发酵保持在最适氧浓度范围。这样便可减少批次之间的波动和更有效地利用空气动力。 需氧发酵并不是溶氧愈大愈好。溶氧较高虽然有利菌体的生长和产物的合成,但当溶氧水平太大,有时会抑制产物的形成。 2、溶解氧浓度的变化规律 在设备和工艺条件不变的情况下,发酵过程中溶解氧的变化有一定的规律。 1)在发酵前期:由于产生菌大量繁殖,需氧量不断大幅度增加,此时需氧超过供养,溶氧明显下降,溶氧曲线出现一个低谷。 2)过了生长阶段,一般需氧量略有减少,溶氧随之上升,次级代谢产物开始形成。 发酵中后期,溶氧浓度明显受工艺控制手段的也许,如补料的数量、时机和方式等。如,在补糖后,菌体的需氧量增加,引起溶氧下降,其下降幅度与菌龄、补糖量及补糖前的溶氧浓度都有关系。如工艺控制不合适,不断地大量补糖,会使溶氧浓度低于临界氧浓度,此时溶解氧就会成为生产的限制因素。 3)在发酵后期,由于菌体衰老,呼吸减弱,溶氧浓度也会逐步上升,一旦菌体自溶,溶氧就会明显地上升。 3、发酵异常时的溶氧变化 发酵过程中若有染菌、污染噬菌体、菌体代谢异常、加油器失灵等异
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