翻译-Pressure_Changes_with_notes研讨.docxVIP

文稿 边栏附注 前言 John: 嗨，大家好！我是 John Henderson，安捷伦科技公司的一名应用科学家，和我在一起的是资深科学家Ron Majors。今天我们将继续为您介绍另一个LC故障排除的话题。在这一部分，我们将同您讨论HPLC仪的压力问题，过高的压力会给您的色谱柱和色谱结果带来麻烦。 Ron? Ron: 这是一个重要的话题，柱压改变是我们最常见到的问题之一。不断变化的柱压往往是色谱系统或色谱柱出现异常的一种征兆。 当微米级的颗粒填入色谱柱，泵推动液体通过这些颗粒时，将会产生很大的阻力。对液流的这个阻力是系统产生背压的原因。 John: 有不少因素会影响系统压力… Ron: 是啊，有五个… 不断变化的压力往往是系统或色谱柱出现异常的一种征兆。 理解压力变化的原因—压力方程 Ron: 让我们看一看压力方程，快速了解都有哪些因素影响柱压。 [ insert pressure_equation.gif]。首先，是溶剂黏度[indicate the viscosity factor on pressure_equation.gif OR put in a build of the slide, with just the first label, for viscosity, showing]。 溶剂的黏度越大，推动液体通过填充柱床需要的力量就越大，因此，压力会上升。例如，假如您以前一直在反相HPLC中使用乙腈作为有机溶剂，现在如果换为黏度很大的异丙醇，您系统的压力会马上随着黏度的增加而呈比例地上升。假如您对常用于梯度洗脱的水-甲醇流动相很熟悉，您应该知道混合溶剂的实际黏度会随着其组成的变化而变化。让我们来看一看这张曲线图 [insert viscosity_pressure.gif]。 从图中我们可以看到，100%纯水时，其黏度（和压力）是相当低的。但是随着甲醇量的增加，实际黏度上升，并在甲醇比例约为45%时达到最大。加入更多甲醇将降低系统压力，在100%纯甲醇时，压力甚至比刚开始时还要低。这种压力的变化是由于梯度洗脱过程中流动相黏度的变化引起的。假如您的系统已经在一个很高的压力下工作，那么由于黏度变化造成的压力些许上升可能会带来问题，它可能会造成系统压力超限并导致停泵。 影响压力的第二个因素是流速。泵推动流动相液体通过色谱柱的速度越快，由流速导致的反压就越高。 [Show pressure-equation again, and circle “L”] 第三个影响因素是L，即柱长。色谱柱越长，需要推动流动相液体通过柱子的压力就越大，因此举例来说柱长加倍，压力也加倍。 但是在压力方程中，可能最不容易令人理解的因素是粒径 [show pressure_equation again, circle the particle diameter]，因为粒径的平方与压力呈反比。因此，当粒径减小一半时，压力上升到原来的四倍，即2的平方。对于新型的亚2微米填料色谱柱，压力会变得很高，因此，一种叫做超高压LC（UHPLC）的全新技术应运而生。 您还会从方程中注意到[show pressure_equation.gif again, and circle the “r”]，柱内径与压力呈反比。保持流速不变，如果您将色谱柱内径从4.6 mm降到2.1 mm，压力会上升5倍。 现在您理解了都是哪些因素会使柱压下降。那么让我们看看我们可能遇到的导致压力变化的常见问题。 实际上，我们有三种类型的压力问题。最常见到的是压力过高。柱压极少出现剧烈变化，柱压的变化通常是逐渐发生的。第二个是压力过低。有一些情况，柱压是下降的而不是上升的。第三种是压力波动，即压力持续不断的变化着。下面我们来分别讨论这几种情况。 压力方程概括了五种影响系统压力的关键因素：溶剂黏度、流速、柱长、柱内径和填料粒径。 影响压力的HPLC系统原因 John: 好，我们先来看一看影响压力的HPLC系统上的原因。包括检测器出口连接的流动相废液管，系统整个流路中出现的任何障碍物都会限制流动相流动。 为了减小柱外峰展宽效应，我们在HPLC中时常采用极小内径（ID）的管线，因此管子本身也会带来背压。事实上，现在要使一些非常高效色谱柱的性能得到实现，经常需要连接极窄内径的管线，如0.12 mm ID的管子。从泵到检测器，即使没有连接色谱柱，由所有这些管子带来的系统背压也存在。因此，仪器硬件对整个系统压力生成是有一定作用的。 Ron: 当然，任何时候有东西滞留在这些细管线内的任何部位，如一粒尘土、一片金属屑或其它类似的东西都有可能会改变您系统的压力。所以像管线、接头、流通池、在线过滤器及其它小体积的系统部件，都很可能驻留障碍物，从而影响您系统的压力。如果任