细胞工程高三第一轮25.docVIP

细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 1、水平：细胞水平或者细胞器水平 2、分类：植物细胞工程和动物细胞工程 植物细胞工程 植物细胞工程：分为植物组织培养和植物体细胞杂交。理论基础都是植物细胞具有全能性。 一、全能性：生物体的任何细胞均具有使后代细胞发育成完整的生物个体的潜能。 1、基础：生物体每个细胞都含有该屋中特有的全套遗传信息，都有发育成完整个体所需要的全部基因。 2、大小：受精卵具有最高全能性，其次是卵细胞，未分化细胞的全能性高于分化细胞，植物细胞的全能性高于动物细胞，分裂能力强的细胞全能性高于分裂能力弱的细胞。 3、在植物体上未表达全能性：特定时间和空间条件下，细胞中基因会有选择性地表达出各种蛋白质，从而构成生物体的不同组织和器官 4、表达全能性的条件：离体，提供营养物质和适宜条件。 二、植物组织培养: （原理是：植物细胞具有全能性） （1）过程： （2）脱分化：高度分化的植物组织、器官和细胞培养成愈伤组织的过程，需要生长素（促进细胞的纵向伸长）、细胞分裂素（促进细胞分裂和组织分化） （3）再分化：由愈伤组织重新培养成根或芽的过程。比值高有利于芽的形成，比值低有利于根的形成，一般情况下先诱导形成芽而后诱导形成根。 （4）愈伤组织的特点：高度液泡化、无定形的薄壁细胞，排列疏松无规则，具有较高的分裂能力而未分化。 （5）两个重要过程：脱分化和再分化 （6）使高度分化的植物细胞恢复分裂能力的过程是：离体、脱分化。 （7）用途：①快速繁殖②培养无病毒植株（茎尖和根尖等顶端分生组织中无病毒，可以将其组织培养成植物就可以获得无病毒植株）③生产药物、食品添加剂等（由愈伤组织中提取）④人工种子：用植物组织培养的方法首先将离体的组织器官和细胞培养到具有生根发芽能力的胚状体，在外面包上能够提供营养的人工种皮（相当于胚乳或者子叶）得到人工种子。（可以解决有些植物繁殖能力差、结子困难的问题），如果是配子培养来的则为单倍体一般不予，如果是体细胞培养来的一般可育。 （8）植物组织培养要求：无菌和人工控制条件下，在人工配制的培养基 无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂等 上培养。 ①灭菌：消灭一定环境中所有微生物的细胞、芽孢和孢子（以消灭芽孢为标准）方法有：培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌；接种环和接种针采用酒精灯外焰灼烧灭菌；手采用75%酒精灭菌。②消毒：消灭一定环境中的病原微生物。 三、植物体细胞杂交：（原理是植物细胞具有全能性和染色体变异） （1）概念：将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新植物体的技术。 （2）步骤：①用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得有活力的原生质体（细胞壁是植物体细胞杂交的障碍） ②原生质体融合。方法是：物理法如离心、振动、电刺激，化学法如聚乙二醇（PEG） ③诱导出现新的细胞壁（新的细胞壁的形成标志着融合的成功） ④利用植物组织培养的方法形成杂种植物（脱分化和再分化）。 （3）意义：①克服了生物间远缘杂交不亲和的障碍，扩大了可用于杂交的组合范围。 ②未解决的问题：让杂种植物按人们需要表现出特定性状。 （4）图解： 动物细胞工程 动物细胞工程分为：动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体技术、动物体细胞核移植等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程的基础。 一、动物细胞培养：是最基本的动物细胞工程，就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 1、培养液：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（与植物组织培养的区别就在于培养基上） 2、材料：动物胚胎或者出生后不久的幼龄动物的组织和器官。 3、工具酶：胰蛋白酶（将组织中弹性蛋白分解，使组织成为游离分散细胞） 4、过程：首先将组织分散成许多单个细胞，方法是从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。然后用培养液将分散的细胞稀释成细胞悬浮液，，将悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养，这个过程叫做原代培养（动物组织消化后的初次培养），原代培养的细胞贴壁生长，而且会出现接触抑制。（培养粘附性细胞时，细胞要能够吸附于底物上才能够生长和繁殖，要求培养瓶或培养皿内表面光滑无毒和易于吸附）。随着细胞的生长和繁殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期用胰蛋白酶是细胞从瓶壁上脱离下来，配成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养，这称为传代培养。 5、细胞株：原代培养的细胞一般培养到10代左右不易传下去，细胞生长停滞，绝大部分死亡，只有极少数细胞度过危机，继续传下去，可以传到40-50代，这些细胞叫做细胞株（遗传物质未改变） 细