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血液分析仪及其临床应用 检测原理 检测参数 细胞直方图 方法学评价 临床应用 血液分析仪使用中应注意的问题 血液分析仪 COULTER ：细胞分析仪 库尔特基金会提供的相片1 血液分析仪发明者库尔特先生 库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别 一、血液分析仪检测原理 血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础） 血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能 检测原理主要内容 1 电阻抗法原理（库尔特原理） 库尔特原理与原理图 仪器的主要组成 白细胞检测原理 红细胞检测原理 血小板检测原理 血红蛋白检测原理 2 VCS法原理 （一） 电阻抗法原理（库尔特原理） 1、库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。 2、 库尔特原理图 3、电阻抗法仪器的主要组成 电阻抗法仪器的主要组成包括： 信号发生器（脉冲检测器） 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 甄别器（除去假脉冲信号） 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数） 4、白细胞检测原理 根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞： 5、电阻抗法红细胞检测原理 电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰： 稀释血液中含有白细胞，当血液进入红细胞 检测通道时，红细胞检测的各项参数中均含 有白细胞因素。正常时，血液红细胞与白细 胞的比例约为500：1～750：l，因此，白细 胞因素可忽略不计。 当病理情况下，如白血病时，白细胞数明显 增高，同时又伴有贫血时，使所得红细胞参 数可产生明显误差。 6、红细胞其他参数的检测 MCV D. HCT MCH MCHC E. RDW 7、血红蛋白测定原理 有关溶血剂 1、ICSH推荐的HICN法：最大吸收峰在 540nm。血红蛋白衍生物是HICH-HB， 试剂反应时间长，5分钟，不适合 全自动仪器。另外，氰化血红蛋白 （CN-HB）：试剂成分氰化钾（剧毒）。 2、非氰化溶血剂（如SDS-HB）： SDS-HB与HICH-HB吸收光谱相似。 8、血小板检测原理 根据电阻抗法，血小板随红细胞在一 个系统中进行检测，在红细胞／血小板计 数池中计数2fl～30fl的颗粒。 有些仪器专门设置了增加血小板准确 性的技术，如鞘流技术、浮动界标、拟合 曲线等。 PLT拟合曲线 仪器进行血小板计数时，计数2fl 一30fl大小的血小板颗粒数量，再拟合 出一条0fl一70fl的曲线，将小部分小 血小板及大血小板包含进去，但拟合曲 线的给出是有条件的，条件不满足时仪 器不能给出拟合曲线。 血小板拟合曲线的条件 1．血小板计数20X109/L 2．直方图呈现对数正态分布 3．直方图的峰值在2一15fl范围 4．PDW20％ （二）光散射法血液分析仪检测原理 光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。 1、光散射法测试原理改进的四种类型 激光与细胞化学法 容量、电导、光散射（VCS）法 电阻抗与射频法 多角度偏振光散射法 2、VCS法原理 应用电阻抗原理测量细胞体积(Volume，V) 技术。 应用电导性（Conductivity C）技术。 检测的原理是：根据细胞壁能产生高频 电流的性能，采用高频电磁探针，测量 细胞内部结构，即以细胞核和细胞质的 比例、细胞内颗粒的大小和密度，来辨 别体积相同、但性质不同的两个细胞群 体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。 2、VCS法原理 应用光散射(Light scatter，S)技术。 原理是：来自激光源的单色光直接扫描 进入计数敏感区的每一个细胞，根据细 胞产生不同角度的散射光(10°一70°)， 可提供细胞形态、核结构等光散射信息，