多糖论文11.doc

藏灵菇多糖提取工艺的优化 陆婧1,2，梁琪1,2,(，张炎1,2，张卫兵1,2，文鹏程1,2，杨敏1,2，宋雪梅1,2 （） extraction technology of Tibetan kefiran LU Jing1,2, LIANG Qi1,2,(, ZHANG Yan1,2, ZHANG Wei-bing1,2, WEN Peng cheng1,2, YANG Min1,2, SONG Xue-mei1,2 (1. College of Food science and Engineering, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070 2. Engineering lab of Functional Dairy Product of Gansu province, Lanzhou 730070;) Abstract: Extraction rates of Tibetan kefiran were taken as indicators, using a single factor experimental and orthogonal test to optimizing the extraction process of Tibetan kefiran, obtaining the optimum extraction process of it : extraction time of 4h, extraction temperature of 85℃, solid to liquid ratio of 1:60, extracted times of 4 times. In this condition, the extraction rate of Tibetan kefiran was 20.96%. The analysis of Infrared Spectra showed that the organic substance which extracted from Tibetan Mushroom possessed Sugar charac- teristic peak, and the sample of heteropolysaccharide contained D-mannopyranose. Key words: Tibetan Kefir; Tibetan kefiran; optimization; technologcial conditions 前言 藏灵菇是一种白色或浅黄色的胶质状物质，外形无规则，多为米粒、花椰菜和薄皮状。藏灵菇中包含有乳酸菌，酵母菌和少量醋酸菌，菇体含有水、粘性多糖、蛋白质、脂质等[1-2]。周剑忠等利用PCR-DGGE指纹图谱技术分析比较了藏灵菇和来自不同地区的开菲尔粒中微生物群落结构，结果表明，藏灵菇和开菲尔粒是一个品系[3]。开菲尔粒中含有一种由微生物产生的杂多糖叫做kefiran[4]，这种由开菲尔粒产生的kefiran是水溶性有抗菌抗肿瘤调节肠道免疫系统，Kefiran的提取，而与其具有较强同源性的藏灵菇中的多糖的提取却很少报道。本研究旨在对影响藏灵菇多糖提取效果的因素进行研究，为藏灵菇中多糖的提取和工业化生产提供科学依据。 1 材料与方法 甘肃乳品实验室保存1.2仪器和设备 UV-5100紫外-可见分光光度计，上海分析仪器有限公司；HWS26型电热恒温水浴锅，上海一恒科技有限公司；GZX-GF101-2-BS-Ⅱ电热鼓风干燥箱，上海一恒科技有限公司；TDD5M低速离心机，长沙平凡仪器仪表有限公司；ML18-4可调式电热板，北京科伟永兴仪器有限公司等；FTIR-650傅里叶变换红外光谱仪，天津港东科技发展股份有限公司。 1.3试验方法 1.3.1藏灵菇粗多糖的提取工艺[10] 准确称取10g藏灵菇，按不同的比例加入不同温度的水中持续搅拌，加热不同时间提取，冷却后在离心力10000g， 20℃下离心20min。向上清液中添加冷无水乙醇并于-20℃静置过夜，在离心力10000g ，4℃离心20min。取离心后的沉淀物加入无水乙醇-20℃静置过夜，离心收集沉淀，将沉淀物分别用无水乙醇和丙酮冲洗3-4次，将得到的沉淀物冷冻干燥得藏灵菇粗多糖。 1.3.2 单因素试验 准确称取藏灵菇样品10g在不同料液比，不同温度的水中，不同提取时间，不同次数下进行单因素试验, 分别考察各个因素对藏灵菇多糖提取率的影响。 1.3.3正交试验设计 在单因素试验的基础上，以提取时间 (A)、提取温度(B)、液料比 (C)、提取次数 (D)为考察因素,采用四因素三水平的正交试验设计优化藏灵菇多糖的提取工艺，正交试验设