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脂质体 Liposomes 吕万良 北京大学药学院药剂系 Tel: Email: luwl@bjmu.edu.cn 脂质体（liposomes）的概念最早是1965年被英国科学家Banghan等提出的。 当磷脂分散在水中时形成多层囊泡，而且每一层均为脂质双分子层，各层之间被水相隔开。这种由脂质双分子层组成，内部为水相的闭合囊泡称之为脂质体。 脂质体主要由磷脂和胆固醇组成。磷脂由一个亲水的头部和两个疏水的尾部组成。 药物被脂质体包封后有以下特点： 1．靶向性和淋巴定向性 2．长效性 3．细胞亲和性与组织相容性 4．降低药物毒性 5．提高药物稳定性 脂质体在体内与细胞的作用过程:分吸附adsorption、脂交换lipid exchange、内吞endocytosis、融合fusion四个阶段。 吸附是脂质体与细胞作用的开始，受粒子大小和表面电荷等因素影响； 脂交换是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换； 内吞作用是脂质体被作为外来异物吞噬，通过内吞，脂质体能特异地将药物浓集于起作用的细胞内； 融合指脂质体的膜与细胞膜融合进入细胞内，然后经溶酶体消化释放药物。 1．中性磷脂磷 磷脂酰胆碱phosphatidylcholine是最常见的中性磷脂。有天然和合成两种来源。与其它磷脂比较，它具有价格低、电中性、化学惰性等性质。 合成的磷脂酰胆碱： 二棕榈酰胆碱dipalmitoyl phosphatidyl choline, DPPC 二硬脂酰胆碱distearoyl phosphatidyl choline, DSPC 鞘磷脂sphingomyelin, SM 磷脂酰乙醇胺phosphatidylethanolamine，PE）。 2．负电荷磷脂 负电荷磷脂又称为酸性磷脂。制备脂质体常用的负电荷脂质有： 磷脂酸（phosphatidic acid, PA）； 磷脂酰甘油（phosphatidyl glycerol, PG）； 磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol, PI）； 磷脂酰丝氨酸（phosphatidyl serine, PS）等。 3．正电荷脂质 正电荷脂质均为人工合成产品，目前常用的正电荷脂质有： 硬脂酰胺（stearylamine, SA）； 胆固醇衍生物等。 正电荷脂质制备的脂质体在基因的传递系统中应用非常普遍。 4．胆固醇 cholesterol 胆固醇（Ch）是自然界膜中的另一类重要的组成成分。 它是一种中性脂质，亦属于两亲性分子，但是亲油性大于亲水性。 5．长循环膜材 长循环脂质体是指含有神经节苷脂GM1ganglioside GM1或聚乙二醇Polyethylene glycol, PEG衍生物的脂质体。 神经节苷脂GM1引入了唾液酸残基增强了膜的稳定性、明显减少了网状内皮系统细胞对脂质体的摄取，延长了脂质体的体内循环时间； 极性的聚乙二醇基则增强了脂质体膜的亲水性，减少了血浆蛋白与脂质体膜的相互作用，阻止网状内皮系统细胞对脂质体的摄取，从而也延长了脂质体的体内循环时间。 脂质体的制备方法很多，常用的有下列几种： 1．薄膜法 Film forming method 该法最早由Bangham报道，这是最早而至今仍常用的方法。 系将磷脂等膜材溶于适量的氯仿或其它有机溶剂，脂溶性药物可加在有机溶剂中，然后在减压旋转下除去溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入含有水溶性药物的缓冲液，进行振摇，则可形成大多室脂质体（multilamellar vesicles, MLV），其粒径范围约1-5?m。 然后可用各种机械方法分散薄膜法形成的类脂膜，形成MLV脂质体。 2．逆相蒸发法Reverse-phase evaporation 最初由Szoka提出。一般的制法系将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶液（水溶液:有机溶剂=1:3-1:6）进行短时超声，直至形成稳定的W／O型乳剂，减压蒸发有机溶剂，形成脂质体。 用逆相蒸发法制备的脂质体一般为大单层脂质体，常称为REVs。 本法特点是包封的药物量大，体积包封率可大于超声波分散法30倍，它适合于包封水溶性药物及大分子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸等。 典型脂质体制备过程 称量脂材料， 如 EPC/CHOL/PEG-DSPE =55/40/5 mol/mol/mol 将脂材料溶解 蒸发形成脂膜 水化形成粗脂质体 挤压形成小脂质体（空白或载药脂质体） 典型脂质体制备方法 薄膜法又称干膜分散法 即将脂质材料及脂溶性药的混合于有机溶剂中，通过氮气或减压除去有机溶剂，在容器底壁上形成脂质薄膜； 然后将溶有药物的水溶液加到脂质薄膜上，室温下放置