Survivin与Smac联合检测在甲状腺肿瘤中的表达及诊断意义.docVIP

Survivin与Smac联合检测在甲状腺肿瘤中的表达及诊断意义 【摘要】 目的 探讨抗凋亡因子Survivin与促凋亡蛋白Smac联合检测在甲状腺肿瘤中的表达及临床诊断意义。方法 80例甲状腺肿瘤患者（患者组）及80例健康志愿者（对照组）为研究对象， 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测技术， 对两组甲状腺细胞中Survivin与Smac的mRNA的表达率进行统计分析研究。结果 患者组的Survivin及Smac阳性率分别为65.00%及78.75%， 高于对照组的8.75%及25.00%， 差异均具有统计学意义 （P 0.05）。结论 Survivin在恶性肿瘤患者肿瘤细胞中表达剧烈， 而Smac表达率则随之下降， Survivin及Smac表达率与甲状腺肿瘤患者肿瘤恶化、好转、良性、恶性肿瘤区分等密切相关， 联合检测在诊断甲状腺肿瘤方面具有很好的临床应用价值。 【关键词】 甲状腺肿瘤；Survivin；Smac；联合检测；诊断意义 DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.025 甲状腺肿瘤是临床最为常见的内分泌肿瘤之一， 随着现代环境的恶化、人们生活节奏的加快加之不健康的生活作息、饮食习惯， 该疾病的发病率呈现出逐年上升的趋势[1]， 尤其对女性的生命健康更是严重的威胁[2]。Survivin和Smac是一组重要的且功能相互拮抗的凋亡调控蛋白， 通过实时荧光定量RT-PCR检测技术能够精确的测量其在甲状腺肿瘤患者肿瘤细胞中的表达效率与正常人体内表达效率之间的差异， 从而确定Survivin与Smac联合检测在甲状腺肿瘤中的表达及临床诊断意义。本次实验通过患者与健康志愿者的对照试验展开探讨， 现将结果报告如下。 1 资料与方法 1. 1 一般资料 选取本院2011年3月～2014年9月接收治疗的80例甲状腺肿瘤患者（患者组）及80例健康志愿者（对照组）为研究对象。患者组中男12例， 女68例；年龄16～71岁；病程1～4年。对照组中男11例， 女69例， 年龄15～73岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较， 差异无统计学意义（P 0.05）， 具有可比性。 1. 2 方法 首先取患者甲状腺肿瘤细胞以及志愿者甲状腺细胞备用， 配置PCR反应体系应用SYBR Green Ⅰ荧光染料技术扩增待测基因及内参基因， 然后按说明书应用Survivin， Smac以及内参引物逆转录成的cDNA。反应体系总体积20 μl， 反应条件：95℃预变10 s， 分别以95及60℃进行5及34 s循环， 共计循环40次， 最后进行溶解曲线分析。设计阴性对照参考， 计算机分析Ct值， 即每个反应管内荧光强度达到系统认为的有效DNA合成时的循环数， 用以评定各因子mRNA的实时定量相对表达水平。 1. 3 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P 0.05表示差异具有统计学意义。 2 结果 患者组的Survivin及Smac阳性率分别为65.00%（52例）及78.75%（63例）， 显著高于对照组的8.75%及25.00%， 差异均具有统计学意义 （P 0.05）。见表1。 3 讨论 细胞凋亡是机体新陈代谢或自我调节的一种重要方式， 一旦人体原癌基因激活， 细胞正常生命周期就会紊乱， 通过非正常基因的表达， 抑制细胞凋亡蛋白正常功能， 导致肿瘤的发生、发展[3]。现代临床研究表明， 甲状腺肿瘤的发生与性别、遗传、体质、生活环境、辐射等因素密切相关， 女性发病率显著高于男性。甲状腺肿瘤的好转、恶化、转移等可以根据体内Survivin以及Smac的mRNA表达率来显示， 其中Survivin阳性率与甲状腺肿瘤恶化、淋巴结转移几率呈正相关， 恶性肿瘤患者癌细胞中Survivin阳性率高达80%以上；Smac阳性率与甲状腺肿瘤的好转、抑制效果呈正相关， 良性肿瘤患者体内Smac阳性率显著优于恶性肿瘤患者， 即Survivin以及Smac在癌症患者体内的表达呈负相关[4]。 Survivin是新近发现的IAPs家族中的成员， 其病理机制在于对凋亡信号下游半光天冬酶-3（Caspase-3）和半光天冬酶-7（Caspase-7）产生抑制作用， 进而抑制细胞的凋亡， 从而使癌细胞无限增值分裂。该基因在正常细胞中的表达率很低， 几乎不表达， 癌细胞中阳性率很高[5]， 这与本次研究结果一致。Smac是一种存在于线粒体并且调节细胞凋亡的蛋白质。一方面 Smac通过抑制IAPs（包括Survivin）激活Caspase-9和Caspase-3而促进细胞凋亡；另一方面， Survivin能与S