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Th17细胞及Treg细胞在喉癌外周血中的表达 　　【摘要】目的：检测喉鳞状细胞癌患者外周血Treg细胞和Thl7细胞比例，研究其变化与意义。方法：采用流式细胞技术检测10例健康对照者和42例喉鳞状细胞癌患者外周血Treg和Thl7细胞比例，并观察Th17/Treg在喉癌分期中的变化。结果：与健康对照组比较，喉癌患者外周血Treg细胞和Th17细胞比例明显升高（P0.05）；发生淋巴结转移者较无淋巴结转移者的Treg和Th17细胞比例增高（P0.05）；通过分析不同喉癌分期中Th17/Treg细胞的分布，结果发现Ⅲ+Ⅳ期组Th17细胞的比例和Ⅰ+Ⅱ期无明显差异，而Treg细胞在Ⅲ+Ⅳ期比Ⅰ+Ⅱ期明显增高（P0.05）。结论：喉癌外周血中Th17和Treg细胞数量增多，二者比例增高，并随着疾病的进展而增加，表明二者均参与了喉癌的发生发展过程。 　　【关键词】喉鳞状细胞癌；Thl7细胞；Treg细胞；表达 　　【中图分类号】R730.6 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）08-0086-02 　　Abstract：Objective To investigate Th17 /T regulatory （ Treg） cell ratio in laryngeal cancer.Methods The two T cell subsets were determined in the peripheral blood of 42 patients with laryngeal squamous cell carcinoma（ LSCC） and 10 healthy volunteers by flow cytometry.Results Compared with the healthy controls，patients had a significantly higher proportion of both Th17 and Treg cells.Higher frequencies of Treg and Th17 cells were found in patients with lymph node involvement.Moreover，The results showed that there was no significant difference in the proportion of Th17 cells and the early stage of cells， while the Treg cells were significantly higher than those in group III and IV.Conclusion Our results suggested a counter regulation of Th17and Treg cells maybe involved in the development and progression of LSCC. 　　Keywords：Laryngeal Squamous Cell Carcinoma； Th17cell； Treg Cell； Expression 　　喉癌是发病率仅次于鼻咽癌的头颈部恶性肿瘤。目前采用手术、放化疗后生存率有显著提高，但是部分患者仍有局部复发和转移。免疫逃逸是肿瘤发生、发展和复发的主要原因，也是体内多种免疫细胞相互作用的结果。其中Thl7细胞及Treg细胞是近年来最受关注的CD4+T细胞亚群，在调节免疫功能中起重要作用，它们在肿瘤形成、发展中的作用和相互关系引起了相关学者的极大兴趣。本研究通过检测不同分期喉癌患者外周血中Th17及 Treg细胞水平的变化，探讨二者表达与喉癌发生、发展及变化的关系，为开发新的免疫治疗方法提供初步实验依据。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料研究对象为2013年1月至12月在南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科收治的、未经任何治疗的男性喉鳞状细胞癌患者42例，年龄41～75岁，平均年龄（54.2±16.4）岁。根据2002年UICC关于喉癌的分期标准，（Ⅰ+Ⅱ）期18例，（Ⅲ+Ⅳ）期24例，其中颈淋巴结转移12例。另外以10例健康体检者作为对照组。受检者在清晨空腹采取静脉血2.0ml，肝素钠抗凝，2000r/min离心10min分离出血清后于-20℃冻存。采用淋巴细胞分离液分离单个核细胞，用于RNA提取和流式细胞术检测。 　　1.2主要试剂APC标记的抗人CD4抗体、PE标记的抗人CD25抗体、FITC标记的抗人IL-17、Foxp3抗体（eBioscience公司）、Th17破膜剂（BF公司）、Foxp3检测专用固