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冬季自然降温对三种蓝莓抗寒生理指标的影响 　　摘要：在东北地区冬季自然低温条件下，以蓝莓（Vaccinium spp.）3个品种美登、北村、圣云为材料，研究了蓝莓一年生枝条内渗透调节物质及保护酶活性的变化，探究蓝莓冬季自然降温过程中的御寒机理。结果表明，整个冬季随着气温降低，蓝莓枝条内可溶性糖含量呈上升趋势；降温初期可溶性蛋白质的积累与抗寒性发展有关，但后期蓝莓不同品种变化趋势各不相同；脯氨酸含量先上升后下降，其积累对圣云的影响大于美登和北村；保护酶活性明显变化，其中过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性均呈先上升后下降的趋势。 　　关键词：蓝莓（Vaccinium spp.）；自然低温；抗寒生理 　　中图分类号：S663；Q945.78 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）09-2142-04 　　蓝莓（Vaccinium spp.）又称越橘、蓝浆果，为杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium L.）灌木类浆果果树，果实中富含氨基酸、维生素、矿物质元素和花色苷[1]，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。目前蓝莓已成为中国最具发展潜力的新兴果树树种之一。 　　东北地区露地栽培蓝莓时需要采取保护措施才能安全越冬，这不仅增加了生产中的成本，而且防寒过程中易造成枝条损伤[2]。蓝莓抗寒性问题已经制约了东北地区蓝莓产业的发展，但是关于蓝莓抗寒性及其相关生理的报道很少[3-5]。试验通过对东北地区蓝莓露地栽培品种――美登、北村、圣云枝条中的保护酶活性和渗透调节物质含量进行比较分析，旨在研究蓝莓在冬季自然降温过程中抗寒生理指标的变化规律，为解决东北地区蓝莓越冬问题提供理论依据，并为选育耐寒品种提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验地设在东北农业大学园艺试验站，温带大陆性季风气候，年平均温度3.6 ℃，极端最高气温36.2 ℃，最低气温-41.4 ℃，年无霜期150 d。年最高温度出现在7月，最低温度在1月。 　　蓝莓试验品种为美登（Blomidon）、北村（Northcountry）、圣云（St. Cloud）。各蓝莓品种在试验地随机采取生长良好的一年生枝条。采样时间为2012年9、10、11、12月和翌年1月的8：00～9：00。为保证蓝莓能够安全越冬，10月进行防寒处理，内部用树枝木板支撑，外部用草帘覆盖埋土。 　　1.2 试验方法 　　可溶性糖含量测定采用蒽酮法[6]；可溶性蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝-G250染色法[6]；超氧化物歧化酶（SOD）活性测定采用NBT（氮蓝四唑）还原法[7]；过氧化物酶（POD）活性测定采用愈创木酚法[7]； 过氧化氢酶（CAT）活性测定采用紫外吸收法[8]；脯氨酸含量测定采用茚三酮显色法[8]。 　　2 结果与分析 　　2.1 渗透调节物质的分析 　　2.1.1 可溶性糖含量 从图1可以看出，3种蓝莓的可溶性糖含量随时间变化呈明显上升趋势。9～10月美登和圣云可溶性糖含量分别上升53%和51%，而北村仅上升30%。10～12月三者可溶性糖含量变化幅度较大，可溶性糖的积累主要发生在10～11月。12月至翌年1月三者可溶性糖含量的可溶性糖含量趋于稳定。不同月份间可溶性糖含量变化明显，品种间可溶性糖含量差异不显著，说明蓝莓能够通过调节自身可溶性糖的含量来降低水势和抵御严寒。 　　2.1.2 可溶性蛋白质含量 从图2可以看出，3种蓝莓可溶性蛋白质含量变化不一致。但9～11月，三者的可溶性蛋白质含量均升高，其中9～10月北村蛋白质含量上升23.7%，圣云蛋白质含量上升18.9%，上升幅度均大于美登蛋白质含量的8.5%；圣云蛋白质含量的上升趋势一直持续到12月，而此时的美登和北村蛋白质含量已经开始下降；美登的蛋白质含量从11月的最高值43.51 mg/g下降到1月的33.25 mg/g，降幅达23.6%，北村蛋白质含量下降缓慢，仅降低了2 mg/g左右。11月至翌年1月，气温继续降低，美登的蛋白质含量显著降低，北村蛋白质含量未发生明显变化，圣云蛋白质含量升高后又降低。 　　2.1.3 脯氨酸含量 从图3可以看出，不同品种蓝莓脯氨酸含量变化趋势不同。9～10月脯氨酸含量均显著上升，圣云脯氨酸含量达到19.2 μg/g，其上升幅度和含量均高于美登和北村。美登脯氨酸含量的上升期是9～12月，随着温度的降低，12月达到最高值22.1 μg/g，上升持续时间大于其他两个品种。北村和圣云的脯氨酸含量在11月至翌年1月处于下降期，变化显著，下降幅度在30%左右。 　　2.2 保护酶活性的分析 　　2.2.1 超氧化物歧化酶（SOD）活性 如图4，9～11月进入冬季驯化阶段，美登的SOD活性逐渐上升，北村和圣云