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解析:在设计实验时,一定要涂布至少3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B不正确。C项涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,此时,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 答案:D 跟踪训练 (2013·广东实验月考)(双选)下列有关实验的叙述正确的是( ) A.果醋发酵阶段应封闭充气口,防止杂菌进入 B.腐乳制作过程中,前期发酵温度过低,腐乳“皮”不易形成 C.研究人类某遗传病的发病率,在多个患者家系中取样调查 D.酵母菌计数时,应先盖上盖玻片再用滴管吸取培养液,从盖玻片边缘滴入计数室 解析:醋酸菌是好氧菌,在发酵时不能封闭充气口。温度过低影响毛霉等微生物发酵,则腐乳“皮”不易形成。调查人类某遗传病的发病率,在人群中随机取样调查。 答案:BD * * 微生物的培养与应用 微生物的实验室培养 1.培养基。 (1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)分类和应用。 ?特别提醒: (1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂),一般不能被微生物利用,只起到凝固作用。 (2)选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物,鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的微生物。 2.无菌技术。 (1)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下几个方面: ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 (2)消毒和灭菌: ?特别提醒: 不能正确区分消毒和灭菌 (1)高温加热灭菌,其原理就是使细菌体内蛋白质变性,而达到杀灭细菌的作用。 (2)化学药剂的灭菌消毒方法,其作用原理是使细菌体内蛋白质变性,但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入细胞内,因此化学方法难以消灭孢子和芽孢。 (3)体积分数为70%的乙醇杀菌效果最强。浓度过低,杀菌力弱;浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其内,杀菌效果受影响。对刚洗刷后未干的器皿,则可选择75%的酒精进行消毒。 (4)高考命题角度。 ①从各种相近的选项中直接筛选消毒或灭菌的方法。 ②给定操作对象,据此选择合适的消毒、灭菌方法。 3.实验操作。 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板→接种→培养 |←牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备→|←纯化大肠杆菌→| (1)接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,并在培养基表面形成由单个细胞繁殖而成的子细胞群体——菌落。 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 优点 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 可以计数,可以观察菌落特征 缺点 不能计数 吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延 适用范围 适用于好氧菌 用于厌氧菌和兼性厌氧菌 注意 事项 (1)接种环的灼烧 ①第一次划线前:杀死接种环上的微生物,避免污染培养物 ②每次划线前:杀死残留菌 种,保证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后:杀死残留菌 种,避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破 (1)稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1~2 cm处 (2)涂布平板时①涂布器用70%酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精 ③酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体 目的 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落 培养 平板冷凝后倒置培养,使培养基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上水珠落入培养基造成污染 【例1】 (双选)下列有关微生物培养的说法正确的是( ) A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是不相同的 B.培养基的pH值因微生物的种类不同而不同 C.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的增殖越有利 D.培养基中加入适量的杀菌剂有利于抑制杂菌的生长 解析:乳酸菌是异养生物,利用现存有机物中的碳源,硝化细菌是化能自养生物,能利用大气中的CO2合成自身的有机物,故乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是不相同的,A正确;不同微生物所需要的pH条件不同,B正确;培养基中的营养物质浓度太高,会导致微生物失水死亡,C错误;培养基中加入适量的杀菌剂虽然有利于抑
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