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第一章病毒第一节病毒的特征和分类
病毒空斑单位(空斑形成单位)(plaque forming unit, PFU) 用少量有破坏宿主细胞能力的病毒去感染已形成致密单层状态的宿主细胞群体时,经过一定培养时间使每个感染细胞周围的细胞逐渐感染崩溃,形成肉眼可见的空斑。在理论上,一个病毒体就可以形成一个空斑,但实际上有不同程度误差。 单位体积病毒数 ?PFU n瓶内空斑平均数X病毒稀释度 每瓶病毒接种量 双层平板法实验步骤 双层平板法与单层平板法的比较 所形成的噬菌斑处于同一平面,易于观察和计数 系列稀释终点 指病毒在植物病株的汁液中保持侵染力的最大稀释限度。 例如:烟草花叶病毒稀释限点为10 -7 病毒的滴度即病毒的毒力,或毒价,衡量病毒滴度的单位有最小致死量(MLD)、最小感染量(MID)和半数致死量(LD50),组织培养感染计量(TCLD50) 培养的50% CPE(细胞病理效应)的最高稀释度 第五节 理化因子对病毒的影响 物理因素 化学因素 光照(辐射) 温度(耐冷不耐热!) 湿度 … 酚、甲醛、氨、醚、氯仿… 强酸、强碱 抗生素、抗体、干扰素 体内灭活 本章课堂学习结束 谢谢大家! 下节课再见! 第一章 病毒 第一节 病毒的特征和分类 第二节 病毒的形态结构 第三节 病毒的繁殖 第四节 病毒的效价测定 第五节 理化因子对病毒的影响 第一节 病毒的特征和分类 非细胞生物 (真)病毒:至少含有核酸和蛋白质组分 亚病毒 类病毒:只含有具侵染性的环状单链RNA 卫星RNA:只含有不具侵染性的RNA 朊病毒:只含有蛋白质 (1)没有细胞结构 (2)只含有DNA或RNA (3)缺乏酶系统 (4)专性寄生 不具备独立代谢能力,在宿主体外仅为不具生命特征的大分子 病毒的特征 病毒的体积非常微小! 多数病毒直径在10~300 nm之间 病毒的发现 病毒可通过细菌过滤器! 技术的进步推动科学的发展! 病毒的分类 一,按核酸分类: 可分为:DNA病毒和RNA病毒 二,按宿主分类: 细胞生物宿主 感染原核生物:噬菌体、噬藻体 感染真核生物 真菌噬菌体 植物病毒 动物病毒 无脊椎动物病毒 脊椎动物病毒 病毒几乎可以感染所有细胞生物,且具有宿主特异性 第二节 病毒的形态结构 蝌蚪状 噬菌体 形态 杆状或丝状 大多为植物病毒 多面体或球形 大多为动物、真菌病毒 病毒的结构 壳 体 核 酸 包 膜 刺 突 核衣壳 含有磷脂和胆固醇 蛋白质衣壳的对称性 立体对称 螺旋对称 复合型 蛋白质衣壳的作用 保护 特异性结合宿主细胞表面 致病性 第三节 病毒的繁殖 病毒的繁殖是指病毒侵染宿主细胞开始到产生子代病毒并释放到细胞外这一过程,也称病毒的生活周期,或病毒的复制(replication)。 噬菌体繁殖的5个阶段 (1)吸附 (2)侵入 (3)增殖(复制与合成) (4)成熟(装配) (5)裂解(释放) 植物病毒 动物病毒 病毒与宿主细胞的特异性吸附 病毒颗粒 宿主细胞的细胞膜(或细胞壁) 放大 噬菌体吸附大肠杆菌 电子显微镜拍摄 病毒基因在宿主细胞内的复制和表达依照严格的时序 在这期间,细胞内看不见成熟病毒颗粒,称为潜伏期(latent period) ⑤ 裂解 (lysis) 噬菌体成熟后,释放水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞裂解,这些新产生的噬菌体被释放出来,重新感染新的宿主细胞,进入下一个循环! 一个被感染的宿主细胞裂解时最多可放出1000个噬菌体! 噬菌体生命周期 的发现 自外裂解(lysis from without) 一个宿主细胞由于同时被多个噬菌体吸附,细胞壁上产生许多小孔,而导致细胞裂解。 噬菌体没有复制 噬菌体的溶原(源)性 烈性噬菌体 温和噬菌体 感染细胞后,其核酸整合进宿主基因组,并同步复制,不产生子代噬菌体,宿主细胞不裂解。 溶原性(lysogeny)现象 含有温和噬菌体的宿主细胞称为溶原细胞 溶原性噬菌体的命名: 例如: Escherichia coli K12 λ 属名 种名 菌株名 溶原性噬菌体 第四节 病毒的效价测定 平板表面均匀长满敏感菌
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