药典2010年版二部色谱法讲义详细分析.pptVIP

主要内容 色谱法的基本概念 色谱法在中国药典中的沿革 中国药典2010年版色谱法内容概况 展望 何为色谱法 色谱法是利用混合物中各组分的理化性质的差异(吸附力、溶解度、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力等)，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相叫固定相，另一相流过此固定相叫作流动相。由于各组分受流动相作用产生的推力和受固定相作用产生的阻力的不同，使各组分产生不同的移动速度，使得结构上只有微小差异的各组分得到分离。再配合相应的光学、电学、电化学和或其他相关检测手段，对各组分进行定性和定量分析的方法。 分离原理 吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 排阻色谱法 特点 分辨效力 分析效率 灵敏度 操作及应用 对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效去除。除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须依法进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶剂与未在正文中列有此项检查的品种，如生产过程中引入或产品中残留有机溶剂，均应按附录“残留溶剂测定法”检查并应符合相应溶剂的限度规定。（凡例 十七） 样品的前处理 0.22，0.45um滤膜——去除颗粒状杂质 C18预处理小柱、On-Guard RP柱——去除有机分子 石墨化碳黑柱——去除色素 On-Guard P柱——去除土壤中腐殖酸、苯环类的化合物 On-Guard H、Na柱——去除溶液中的金属离子 On-Guard Ag柱——去除溶液中的Cl-离子，主要测定高氯（海水）物质中的NO2-，NO3-等离子 在线／离线除糖——氨基酸样品分析时，除去糖对氨基酸检测时的干扰 * 生命至上 技泽天下 离子色谱法应用 * 生命至上 技泽天下 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 * 生命至上 技泽天下 帕米膦酸二钠注射液 三、离子色谱在药品分析中的应用 * 生命至上 技泽天下 * V D 高效液相色谱法 系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 V D 高效液相色谱法 (1) 色谱柱 反相 (非极性:C18、C8、CN、NH2)(组分的出峰顺序：极性大的先出峰，极性小的后出峰。 ) 正相 (极性：硅胶)主要用于分离溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物(极性：固定相流动相) 离子交换 分子排阻 对映异构体 V D 高效液相色谱法 (1) 色谱柱 除另有规定外，普通分析柱的填充剂粒径一般在3~10μm之间，粒径更小(约2μm)的填充剂常用于填装微径柱(内径约2mm)。 使用微径柱时，输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配；如有必要，色谱条件也需作适当的调整。当对其测定结果产生争议时，应以品种项下规定的色谱条件的测定结果为准。 V D 高效液相色谱法 (2) 检测器 选择性 紫外、荧光、电化学 通用型 蒸发光散射、示差折光 V D 高效液相色谱法 (3) 流动相 反相色谱系统的流动相首选甲醇-水系统(采用紫外末端波长检测时，首选乙腈-水系统)，如经使用不合适时，再选用其他溶剂系统。应尽可能少用含有缓冲液的流动相，必须使用时，应尽可能选用含较低浓度缓冲液的流动相。 其中，调整流动相组分比例时，以组分比例较低者(小于或等于50%)相对于自身的改变量不超过±30%且相对于总量的改变量不超过±10%为限，如30% 相对改变量的数值超过总量的10%时，则改变量以总量的±10%为限 。 V D 高效液相色谱法 系统适用性试验 理论板数 分离度 重复性 拖尾因子 V D 高效液相色谱法 测定法 内标法 外标法 加校正因子的主成分自身对照法 不加校正因子的主成分自身对照法 面积归一化法 司帕沙星 P221 消旋山莨菪碱 P866 硫酸卡那霉素 P967 氨基糖苷类抗生素 蒸发光散射检测法 阿米卡星 P388 柱前衍生化法 V E 气相色谱法 系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号。 V E 气相色谱法 载气源 进样部分 色谱柱 柱温箱 检测器 数据处理系统 V E 气相色谱法 结构确证 质谱检测器（MS） 卤素等化