三微生物学与免疫学实验准备.docVIP

实验安排 第1次实验：培养基的制备与灭菌，土壤中细菌的分离、纯化 下午：配牛肉膏蛋白胨培养基、分装无菌水、准备移液管 晚上：分离 培养两天，而后分离平板放冰箱，下周观察，不安排课后时间。(冰箱不够考虑借！)，6板/组(2人)，测定10-4 ×3，10-5×3，1mL量 第2次实验：分离、纯化， 下午：观察、计数、纯化（平板到斜面，每人两支斜面；混菌划线：大肠，滕黄微球菌和自己分离的红色细菌，4板/组） 实际：本预计三种颜色菌落较为好看，但由于红色细菌量明显占优势，平板上以红色细菌为主，较少的平板能显示三色菌落。 建议以后还是只有两种，用藤黄和大肠。 晚上：（空） 第3次实验：G 染色，芽胞染色，（接种时，试管上标号不用中文名称，用代号标识，同一菌株，不同标识，单双号区分不同菌株！准备放线菌土壤，凉一个月） 下午：挑混菌划线平板到斜面（3支/人，3种菌株），用平板上菌落染色，老师再提供大肠，金葡两标准株作革蓝氏染色， 实际：教师两株（大肠，金葡），学生两株（划线平板上菌落红色细菌，藤黄大肠或大肠） 建议平板到斜面用3支/人第5次实验：大分子水解，糖发酵，IMViC 讲解观察生理实验结果（上周培养好放冰箱）。 快速鉴定，快速鉴定接种， 周二 菌株号 鉴定板 类型 鉴定结果 VP Indole 乳糖 甲基红 柠檬酸 淀粉 硫化氢 （未作） 氧化酶 形态和G 鉴定拉丁名 中文名 可信度 大肠杆菌 RSE Escherichia coli 大肠杆菌 0.9952 － ＋ (+) ＋ － － － － 杆G－ 紫红色细菌 RSE Shewanella putrefaciens 腐败西瓦氏菌 0.9815 + － - + ＋＋ - ？ ＋ 杆G－ 枯草芽孢杆菌 RGP 未鉴定出 ＋ － - ＋ － ＋ ？ 金黄色葡萄球菌 RGP Staphylococcus saccharolyticus Or Staphylococcus lentus 解糖葡萄球菌 或 缓慢葡萄球菌 0.9512 0.9589 地衣芽孢杆菌 RGP 未鉴定出 藤黄微球菌 RGP Kocuria rosea 0.9877 氧化酶实验试剂：N,N- 二甲基对苯二胺盐酸盐 N,N-dimethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride 周三 菌株号 鉴定板 类型 鉴定结果 VP Indole 甲基红 柠檬酸 淀粉 硫化氢 （未作） 氧化酶 形态和G 鉴定拉丁名 中文名 可信度 肠杆菌 RSE（假） 紫红色细菌 RSE（假） 未知一 RGP Bacillus cereus 腊状芽孢杆菌 未知二 RGP Bacillus cereus 腊状芽孢杆菌 柠檬酸盐产酸变黄 RGP Brevibacillus brevis 0.8346 1202 RGP Staphylococcus lentus 0.997 周五 菌株号 鉴定板 类型 鉴定结果 VP Indole 甲基红 柠檬酸 淀粉 硫化氢 （未作） 氧化酶 形态和G 鉴定拉丁名 中文名 可信度 金 RGP 枯 RGP 地 RGP 未知三 RGP 未知一 RGP (假) 未知三 RGP（假） 第6次实验：霉菌观察（根霉用斜面，别的用平板） 霉菌观察：根霉，青霉，米曲霉 晚上：霉菌观察：镰刀菌，交链孢霉，构巢曲霉， 第7次实验：消毒 下午：配牛肉膏蛋白胨培养基（10人一配分五瓶，100mL/150mL三角瓶用于倒四个平板）、分装无菌水、中和剂、PBS、准备移液管等（具体量看附件），移液管干热灭菌，别的小锅灭菌。 第8次实验：放线菌抗菌活性菌株筛选――选择性分离（开始安排让教学实习研究生开始作酵母多糖发酵与多糖含量测定预备试验） 下午：配培养基，高氏，牛肉膏（用于抑菌实验）无菌水等 晚上：分离，两个浓度，每个浓度2板。 10-3取0.5mL，10-4取0.5mL， 第二天：(第一天实验较乱，今天实验分组和内容都有所改变，如下：) （牛肉膏蛋白胨培养基原来实验剩很多，购周三周五两天实验用，周三周五同学不配该培养基，以后该实验的牛肉膏蛋白胨培养基放在消毒实验中一起配制。周一剩余的高氏一号培养基够用于学生标准菌