第八章细胞凋亡分解.pptVIP

Normal functions of apoptosis 1 1 Deleting structures that are no longer required e.g. regression of the tadpole tail 2 Sculpting 3 Adjusting cell numbers in developing tissues, e.g. the nervous system NGF NGF NGF target cells developing neurons NGF NGF NGF target cells Normal functions of apoptosis 2 4 Tissue homeostasis, e.g. liver regeneration / regression 7 Killing of pathogen-infected cells by cytotoxic T cells 6 Removing potentially harmful cells e.g. developing T and B lymphocytes with self-reactive antigen receptors Eliminating injured / damaged cells, e.g. cells with damaged DNA CTL 肿瘤细胞 CTL正在诱导肿瘤细胞凋亡 二） 细胞凋亡与疾病发生的关系 1. 死亡受体通路 凋亡诱导因素 死亡受体/配体的表达、结合 Caspase-8活化 Caspase-3活化 apoptosis Bid活化 线粒体通路 活化 2. 线粒体通路 时 间 主 要 发 现 参 考 文 献 1994年　首次提出线粒体在细胞凋亡中是不可缺少的 Newmeyer,et al. 1996年　线粒体中细胞色素C的释放引起细胞凋亡 Liu,et al,[5] 1997年 证明Caspase-9在细胞色素C和dATP存在时 与Apaf-1结合并被激活，再激活Caspase-3 Li,et al.[6] 1998年 膜死亡受体通路通过Bid作用于线粒体信号通路 Luo,et al.[24] 1999年 ?线粒体释放Caspase-2,9参与凋亡的发生线粒体 Susin S A,et al.[8] 释放AIF参与凋亡的发生 Susin S A,et al.[9] 2000年 线粒体释放Smac/DIABLO参与凋亡发生 Du,et al[10]. Verhagen,et al[11] 2001年????线粒体释放核酸内切酶G引起“DNA　ladder” 的产生 Li,et al.[12] 线粒体释放 Smac样的丝氨酸蛋白水解酶HtrA2/Omi， 后者通过抑制IAP促进细胞凋亡 Suzuki,et al.[19] 细胞凋亡线粒体信号通路研究中的重要发现 凋亡诱导因素 PTP开放 线粒体中细胞色素C等释放 Caspase-9活化 Caspase-3活化 apoptosis 3. 凋亡蛋白酶 Caspases: cysteine-containing aspartate-specific protease（含半胱氨酸的天冬氨酸特异水解酶） 是一组对底物的天冬氨酸部位有特异水解作用，其活性中心富含半胱氨酸的蛋白酶。 1 定义及分类 apoptosis 概 述 ①以无活性的形式存在。 ②在Pro-Caspases的N端均含有一段的前区域（Prodomain）。 ③活性形式均是由2个大亚基和2个小亚基组成的杂四聚体。一分子Pro-Caspase只能分裂产生1个大亚基和1个小亚基 。 ④在大亚基的C端均含有QACXG（X R.Q或G）的活性中心，其中半胱氨酸（C）是必需氨基酸，故 Caspase是属于半胱氨酸蛋白酶类。 2 结构特征 3 caspase的作用底物 ① 凋亡蛋白酶激活的DNA酶抑制物 ICAD ② 核纤层（lamina）蛋白 ③ 细胞骨架蛋白：导致细胞解体，形成凋 亡小体 ④ 其他的caspases ⑤ 灭活细胞凋亡的抑制物 使抑制凋亡因子失活，如CAD/ICAD 破坏细胞结构，如Lamina 将调节区与催化区分离，使蛋白失活，如Gelsolin 4. 内源性核酸内切酶与DNA片断化 CAD激活方式 DNA断裂与“梯状条带” 1 DNA断裂与“梯状条带” 2 典型凋亡细胞DNA琼脂糖凝胶电泳（呈现梯状条带） 三 细胞凋亡相关基因 抑制凋亡基因：Bcl-2，IAP 促进凋亡基因：wtP53，Bax 双向调控基因：c-myc，Bcl-x Bcl-2----B cel