国自然面上项目标书范例【参考】.doc

申请代码 H1606 受理部门 收件日期 受理编号 国家自然科学基金 申 请 书 (2010版) 资助类别：面上项目 亚类说明： 附注说明： 项目名称：Pyk2促进肝癌细胞迁移的一个新的分子机制研究：结合并磷酸化E-cadherin? 申 请 人： 电话： 依托单位： 通讯地址： 邮政编码：266021 单位电话： 电子邮箱： 申报日期： 2010年2月26日 国家自然科学基金委员会 基本信息yoKWT/OQ 申 请 人 信 息 姓名 性别 男 出生 年月 1973年4月 民族 汉族 学位 博士 职称 副主任医师 每年工作时间（月） 8 电话 电子邮箱 传真 国别或地区 中国 个人通讯地址 工作单位 主要研究领域 肿瘤分子生物学 依托单位信息 名称 联系人 电子邮箱 电话 网站地址 合作研究单位信息 单 位 名 称 项 目 基 本 信 息 项目名称 资助类别 面上项目 亚类说明 附注说明 申请代码 H1606:肿瘤复发与转移 H1617:消化系统肿瘤 基地类别 研究年限 2011年1月 — 2013年12月 研究属性 基础研究 申请经费 35.0000万元 摘 要 (限400字)：E-cadherin的丧失与肝癌转移密切相关。其丧失的主要原因是由于其酪氨酸残基被磷酸化后蛋白被降解。我们通过酵母双杂交发现一个新的能与E-cadherin相互作用的非受体型酪氨酸激酶Pyk2。Pyk2活性增强可促进肝癌细胞迁移。本课题假设Pyk2结合并磷酸化E-cadherin，导致E-cadherin蛋白降解，细胞迁移性增加。本课题设计首先通过GST pulldown、免疫共沉淀证明二者相互作用可靠；其次通过磷酸化实验确证Pyk2可以磷酸化E-cadherin；然后应用细胞迁移实验和裸鼠成瘤实验确定：Pyk2通过磷酸化E-cadherin而影响肝癌细胞迁移和肿瘤转移；最后分析在人肝癌标本中二者表达的相关性以及与转移的关系。本课题新发现Pyk2可以直接磷酸化E-cadherin，促进肝癌细胞迁移和肿瘤转移，具有国际先进性。这对于肝癌侵袭转移的复杂机制有新的理解，对于药物研发提供新的思路。 关 键 词(用分号分开，最多5个) 肝癌；E-cadherin；Pyk2；肿瘤转移  经费申请表 （金额单位：万元） 科目 申请经费 备注（计算依据与说明） 一.研究经费 28.7500 ????? 1.科研业务费 7.6000 ????? （1）测试/计算/分析费 2.1000 DNA测序，生物信息分析，统计分析 （2）能源/动力费 ????? ????? （3）会议费/差旅费 1.0000 参加学术会议3-4人次 （4）出版物/文献/信息传播费 3.0000 文献检索，发表论文，专利申请 （5）其他 1.5000 成果鉴定 2.实验材料费 21.1500 ????? （1）原材料/试剂/药品购置费 17.1500 各种试剂盒，脂质体，抗体，细胞培养，实验耗材 （2）其他 4.0000 动物饲养，临床调研 3.仪器设备费 0.0000 ????? （1）购置 ????? ????? （2）试制 ????? ????? 4.实验室改装费 ????? ????? 5.协作费 ????? ????? 二.国际合作与交流费 1.5000 ????? 1.项目组成员出国合作交流 ????? ????? 2.境外专家来华合作交流 1.5000 邀请美国康奈尔大学关军林教授合作交流 三.劳务费 3.0000 研究生加班补贴 四.管理费 1.7500 5%管理费 合 计 35.0000 ????? 与本项目相关的其他经费来源 国家其他计划资助经费 ????? 其他经费资助（含部门匹配） ????? 其他经费来源合计 0.0000  报告正文一、立项依据与研究内容： （一）项目的立项依据 原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，我国的肝癌发病数占全球所有肝癌病例的一半左右，因此我国对于肝癌的研究显得非常迫切[]。[2]。 E-cadherin在肝癌细胞的侵袭、转移中起到了不可忽视的作用。E-cadherin属于钙粘附蛋白家族(Cadherin 家族)，在调节细胞与细胞之间、细胞与基质之间的粘附反应，E-cadh