产漆酶菌株的筛选与酶活性的测定论文.docVIP

目 录 摘要 I Abstract II 前言 1 1 材料与方法 2 1.1 实验材料与方法 2 1.2 培养基 3 1.3 实验方法 3 1.3.1 产漆酶菌株的筛选 3 1.3.2 漆酶液态发酵及其制备 3 2 漆酶酶活性的测定 4 2.1 ABTS-分光光度计法 4 2.2 分光光度法具体步骤 4 2.3 4 3 菌株的活化 4 3.1 培养基及主要试剂的配置 4 3.2 菌种活化步骤 5 4 改良CTAB法提取待测菌株全基因组 5 5 5 结果与分析 6 6 讨论和小结 9 1. 讨论 9 2. 小结 9 参考文献 10 致谢 11  摘要 本实验从南昌农药厂土壤中分离筛选出一株能够产漆酶活性的细菌菌株，并初步分析和鉴定了该菌株。此菌株具有生长快速、遗传稳定、菌落规则的特性。为了从土壤中筛选产漆酶酶活相对较高的菌株，采用以愈创木酚为底物，利用平板筛选法和定性测定酶活力法筛选得到高产漆酶菌株。以ABTS〔2,2’-连氮基-双（ 3-乙基苯丙噻唑啉-6-磺酸）〕为底物测定漆酶活得到产漆酶活性的菌株，菌株的产酶高峰期出现在发酵培养基培养后的第6天，最高的产漆酶活为5.33U。通过测序和序列比对得到此菌株为溶血葡萄球菌 JCSC1435（hemolytic Staphylococcus JCSC1435）。适宜的发酵培养基为