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中华芦荟组培快繁试验研究.doc
中华芦荟组培快繁试验研究
摘要 以中华芦荟茎段为材料,筛选出了MS为较适宜于中华芦荟试管苗生长的培养基,结果表明:初代培养基中,6-BA浓度以2.0~3.0 mg/L、蔗糖浓度以3%为宜;继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为最佳,芽增殖系数为4.50;生根培养中,不同浓度NAA激素对试管苗生根率和生根数都有极显著的影响,生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L 为最佳,生根率达100%,平均生根数6.3条;试管苗炼苗7~10 d后移栽到蘑菇土∶沙土=3∶1的基质上,移栽成活率可达97%以上。
关键词 中华芦荟;茎段;组培快繁
中图分类号 S682.33 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2013)19-0188-01
芦荟为百合科多年生肉质草本植物,中华芦荟(Aloe vera L.var.chinensi)是库拉索芦荟的优良变种。近年来,芦荟产业发展迅速,芦荟产品深受人们的喜爱,其应用前景广泛。但因芦荟雌雄花开不同步,种子育苗困难[1] ,而目前的繁殖方法以芽分生为主,不能大规模快速繁殖,影响了芦荟产业的发展。因此,笔者在前人研究的基础上,以中华芦荟茎段为材料,探索促进茎段丛生芽分化及瓶苗壮苗生根的方法,为大规模快速生产芦荟组培苗提供理论和实践依据[2-6]。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试中华芦荟幼苗材料,由厦门远太景观规划设计工程有限公司苗圃基地提供。供试试剂为75%酒精、0.1%升汞、激素(6-BA)、生长素(NAA)、蔗糖、琼脂等。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的选取及消毒。取株高为15~20 cm的中华芦荟,剥去其外层叶片及根系,先用自来水将茎段冲洗干净,然后将其放置在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s,再用0.1%升汞灭菌10 min,最后用无菌水将其冲洗4~5次。消毒完毕,应将芦荟茎段接种于不同的诱导培养基上。
1.2.2 培养基及培养条件。以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素(6-BA)、生长素(NAA),添加蔗糖3%、琼脂0.65%,pH值5.8,培养温度为26~28 ℃,光照强度2 000~2 500 lx,光照时间10~12 h/d。
2 结果与分析
2.1 不同诱导培养基对中华芦荟侧芽萌发的影响
将中华芦荟茎块外植体接种到不同的诱导培养基上,发现其均在10 d以后萌发,接种后20 d开始调查不同诱导培养基对中华芦荟侧芽的萌芽率。从表1可以看出,不同诱导培养基处理之间存在显著差异,以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L生长快速、芽粗壮,萌芽率达100%,不加激素的MS培养基处理生长缓慢,且萌芽率仅90%。
2.2 不同激素配比对中华芦荟继代培养的影响
将2.1中诱导成功的芦荟芽接种至继代培养基中培养,10 d左右即开始从腋芽处诱导出分化芽。重复此过程,可获得大量芦荟芽。从表2可以看出,MS+6-BA3.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L的处理增殖效果最好,增殖系数达到4.50,增殖芽苗数达90株。以MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L的处理增殖芽苗数最少,为53株,增殖系数为2.65。
因此,应选用MS+6-BA 3.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L对中华芦荟进行继代培养。
2.3 不同激素配比对中华芦荟不定根诱导的影响
将2.2中获得的2~3 cm长的增殖芽切成单株转入生根培养基。10 d左右开始长根,根的颜色为淡黄色[7-9],从调查结果表明,以添加NAA 0.3 mg/L的表现较好,20 d后,平均每株生根数为6.3根。而其他处理的都较差,说明生根培养基以1/2 MS+NAA 0.3 mg/L为佳(表3)。
2.4 不同种植处理方法对幼苗成活的影响
将已长出2~5条根、株高5~10 cm的瓶苗洗去培养基,然后将洗净的小苗放在遮阳网下晾干,放置7~10 d后叶片颜色转为褐绿色即可假植,移栽前将培养基质用600倍的高锰酸钾淋湿、覆盖消毒7 d。移栽时,将小苗移栽到已灭菌的土壤中,调查结果表明,盖膜保湿处理因湿度在85%以上,7 d
后幼苗从头部开始腐烂,15 d后统计结果,成活率约82%,而处理除个别较弱小死苗外,成活率在97%以上(表4)。
3 结论与讨论
茎段是诱导不定芽的最佳选择,在取材中认为取自较小的幼苗由于茎径太小,所以不易成功,选取20~30 cm的植株较适合,且每个茎块应在1~2 cm。试验结果表明,增殖培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L是较佳的配方,增殖系数达4.50,但经继代多次后是否产生变异影响
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