专题一 基因工程
·最新考纲1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
一、基因工程的基本工具
1.限制性核酸内切酶
(1)来源:主要从原核生物中分离纯化而来。
(2)作用:识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)结果:产生黏性末端或平末端。
2.DNA连接酶
(1)作用:将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。
(2)类型
常用类型 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 3.载体
(1)常用载体——质粒(2)其他载体:λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。
深度思考
如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,则图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序如何?
提示 限制性核酸内切酶能将DNA分子切割为DNA片段,符合图中①;DNA聚合酶在DNA复制过程中将脱氧核苷酸连接成DNA链,符合图中④;DNA连接酶能连接不同的DNA片段,符合图中②;解旋酶能打开DNA双链形成DNA单链,符合图中③。故正确顺序应为①④②③。
二、基因工程的操作程序
1.—2.—组成
3.—方法
4.—深度思考
基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制
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