高中生物选修 ?基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 ?生物体外 操作对象 ?基因 操作水平 ?DNA分子水平 基本过程 ?剪切→ 拼接→导入→ 表达 实质 ?基因重组 结果 ?人类需要的基因产物(定向的) (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列(回文序列),并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(注意“酯”的写法)
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和
T4DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)DNA聚合酶、RNA聚合酶和DNA连接酶的比较:
3.“分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA
片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 ④安全无毒 ⑤大小合适
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
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