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1.(2016·锦州模拟)回答下列微生物培养的问题:
(1)如表是某培养液成分含量表,该培养液培养的微生物同化作用类型是________;若用此培养液培养固氮微生物,则应除去的成分是________,应加入的物质是________。
编号 成分 含量 ① (NH4)HCO3 0.5 g ② KH2PO4 3.0 g ③ CaSO4 0.5 g ④ FeCl2 0.5 g ⑤ 维生素 少许 ⑥ 水 1 000 mL (2)下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:
成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl H2O 含量 0.5 g 1 g 0.5 g 100 mL ①牛肉膏、蛋白胨在培养基中的作用是提供________、________、________等营养。
②要用表中所给材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是________。
③表中各成分含量确定的原则是________________________。
④培养基配制好后,分装前应进行的工作是________。
⑤从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌感染的方法是________、________、________等。
(3)微生物接种的方法很多,最常用的是________和________。
解析:(1)培养基中不含有机碳源,可判断培养的生物同化类型为自养型;若用此培养液培养固氮微生物,则应除去氮源(NH4)HCO3,但需加入有机物提供碳源。(2)根据所培养微生物对各营养成分的需要量配制培养基的成分,若需观察细菌菌落状况需用固体培养基,还需添加琼脂;微生物培养时需对培养基、接种工具进行无菌处理,并进行严格的无菌操作。(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
答案:(1)自养型 (NH4)HCO3(或①) 有机物
(2)①碳源 氮源 维生素(或磷酸盐等) ②琼脂(凝固剂) ③所培养微生物对各营养成分的需要量 ④调整pH ⑤高压蒸汽灭菌 烧灼接种环 酒精棉擦手(或棉塞塞试管口、在火焰旁接种)
(3)平板划线法 稀释涂布平板法
2.(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、____________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的________。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。
(5)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
解析:(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌;消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒,紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例适合。(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的鉴定。(5)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
答案:(1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)灭菌
3.(2016·银川统考)人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:
(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有________、________和________。
(2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在________旁进行操作。接种后的培养皿进行________,并在37 ℃的________中培养。
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