实验四植物胚的初代培养学案.docVIP

实验四、植物胚的初代培养 实验目的 掌握外植体的选取与消毒技术 掌握无菌操作接种技术 二、实验原理 离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。胚状体的形成是指从培养的组织或细胞中直接或间接形成胚胎的生长方式。直接形成胚胎是指在外植体上直接分化出胚状体；间接形成胚胎是指在外植体上先分化出胚性愈伤组织，然后由胚性愈伤组织再分化形成胚状体。 初代培养：即接种某种外植体后，最初的几代培养。初代培养旨在获得无菌材料和无性繁殖系。初代培养时，常用诱导或分化培养基，即培养基中含有较多的细胞分裂素和少量的生长素。初代培养建立的无性繁殖系包括茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。 脱分化：已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的细胞 ? 脱分化的机理：离体后细胞膜的透性改变，细胞核增大，内质网扩大，蛋白质，酚类物质的合成活跃，从中完成了脱分化。 ? 再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下，又可经过愈伤组织或胚状体，再分化出根和芽，形成完整植株 影响再分化的因素：损伤 培养基中成长素与细胞分裂素的配比 培养条件，光照温度