过硫酸钾氧化紫外分光光度法.docVIP

过硫酸钾氧化紫外分光光度法 1 原理 总氮 total nitrogen（TN），指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量，包括水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。在60℃以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子。分解出的原子态氧在120℃～124℃条件下，使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220及A275，按以下公式计算校正吸光度A， A＝A220－2A275 总氮（以NO3-N计）含量与校正吸光度成正比。 过硫酸钾分解反应式如下： K2S2O8+H2O→2KHSO4+21O2 KHSO4→K++HSO4- HSO4-→H++SO42- 本方法的有效测定范围为0.20mg/L～7.00mg/L。 2 实验用品 2.1仪器：1000ml容量瓶、100ml容量瓶、10ml比色管若干、最大量程分别为5ml、1ml、0.2ml的移液枪一支、分光光度计； 2.2 药品：氢氧化钠、过硫酸钾、硝酸钾、浓盐酸（ρ（HCl）=1.19g/ml）、浓硫酸（ρ（H2SO4）=1.84g/ml）； 2.3 试剂配制： （1）碱性过硫酸钾溶液:称取40.0g 过硫酸钾，溶于600ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g 氢氧 化钠溶于300ml水中。待氢氧化钠溶液恢复到室温后，混合 两种溶液定容至1000ml，并存放在聚乙烯瓶内，可保存一周； （2）硝酸钾标准贮备液： 称取0.7218g硝酸钾，溶于适量水中，移至1000ml容量瓶中定容，混匀。其中的总氮含量为100mg/L。加入1ml～2ml三氯甲烷为保护剂，在0℃～10℃暗处保存，可稳定6个月； （3）标准硝酸钾工作液：准确移取硝酸钾标准贮备液10.00ml至100ml容量瓶中定容，混匀，临用现配。其中的总氮含量为10mg/L； （4）5mol/L NaOH溶液 :称取20gNaOH，加水定容至100ml； （5）硫酸溶液：取10ml浓硫酸加入350ml水中冷却备用； （6）盐酸溶液：取10ml浓盐酸加入90ml水中冷却备用； 3 实验步骤 3.1标准曲线 取10支试管，按下列表格加入试剂显色，以蒸馏水为参比水样进行调零，并测定吸光值A220、A275 项目 0 1 2 3 4 5 6 硝酸钾标准工作液/ml 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 各个管分别加水稀释至4ml 碱性过硫酸钾溶液/ml 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 塞紧管口后，于高压蒸汽灭菌锅121oC反应30min，冷却至室温 盐酸溶液/ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 用蒸馏水定容至10ml 对应各管中4ml溶液总氮浓度（以NO3－N计）/(mg/L) 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 A275 0.011 0.010 0.014 0.010 0.014 0.012 0.015 Ar= A220—2 A275 0.053 0.132 0.245 0.322 0.382 0.470 0.561 A= Ar—Ar（0） — 0.079 0.192 0.269 0.329 0.417 0.508 以编号1～7的数据作标准曲线，横坐标为对应各管中10ml溶液总氮浓度（以NO3－N计）（mg/L），纵坐标为A； (附图为3月28日数据) 3.2水样的测量 取0.2ml经处理过的水样（如有必要先稀释或减少用量）于10ml比色管，用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH至5～9，然后加入蒸馏水稀释至4ml后，分别加入2ml碱性过硫酸钾溶液，然后塞紧管口后，置于高温蒸汽灭菌锅121oC加热30min，冷却至室温；之后分别加入盐酸溶液0.4ml，用水稀释至10ml；以蒸馏水为参比水样进行调零，并测定各管吸光值A220、A275，计算各个吸光值Ar=A220—2A275各值减去空白试验（即标准曲线0号管的吸光值Ar(0)=A220(0)—2A275(0)）即为校正值A（此全过程应与标准曲线同时操作）； 项目 0 A B C D E F … 水样/ml 0 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 … 各个管分别加水稀释至4ml 稀释倍数 1 1 1 1 1 1 1 … 碱性过硫酸钾溶液/ml 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 … 塞紧管口后，于高压蒸汽灭菌锅121oC反应30min，冷却至室温 盐酸溶液/ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 … 用蒸馏水定容至10ml A220