分子生物学摘要.ppt

细菌人工染色体 (BAC) engineered versions of F plasmids； capable of carrying approximately 200 kb of inserted DNA sequence； one copy per cell (oriS)； The DNA inserted stable;less prone to rearrangements and deletions ; Human artificial chromosomes (HAC) 设计思路与YAC一致：CEN、TEL、ARS，但是更复杂； 迄今仍不成熟； 可能会成为基因治疗的载体； 13 DNA重组中的基因与受体细胞 以表达基因产物为目的的重组技术的外源基因可以来自于基因组DNA(原核、真核)，也可以来自于mRNA的反转录产物（cDNA）; 如果是在原核细胞中真核基因，则必须用基因的cDNA序列； 如果是在真核细胞中表达真核基因，有人认为选用基因组DNA序列为好，但多数实例选用的是cDNA序列； 外源基因的获得 外源基因的来源非常多：文库筛选、PCR扩增的、差别显示得到，等等； 在某些情况下，必须人工合成基因（有机化学法）：优化密码子； 方法举例1：分段合成、粘端连接法（烦琐） 方法举例2：分段合成结合PCR法（巧妙，避免连接反应） 360bp 两个PCR体系，一体系