疟原虫常识与镜检20140814_培训课件.pptVIP

薄血膜 P.v.R P.f.R 大小：约占RBC的1/3 约占RBC的1/5 部位：RBC里少见多个虫同时寄生 RBC的边缘 、常见多个虫同时寄生 核： 大、较松、两核少见 小、致密、两核多见 胞浆：较粗、不规则 纤细、规则 P.v.R 对 比 P.f.R 厚血膜 间日疟 恶性疟配子体 恶性疟环状体 间日疟环状体 间日疟配子体 镜 检 技 术 1. 采血时间： P.v —— 发作后10小时内采血，各期（R、T、S、G）疟原虫均可查见。 P.f —— 发作时采血可查到 R；发作后10天左右采血可查见 G。 2. 厚薄片的制作： 厚血膜—取约4ul血液置于玻片合适位置上，用推片一角由里向外旋 转2-4圈，涂成直径0.8-1厘米大小的圆形均匀血膜。 薄血膜—取约1.5ul血液置于载玻片合适位置上，推片血滴外侧靠近并接触，与载玻片成30°夹角，快速均匀推出，推成宽2厘米、长2.5厘米的血膜。 每片制作一个厚血膜，一个薄血膜（见下图）。玻片头可粘 贴患者信 息，亦可在薄片头以铅笔写上患者姓名、编码等。 3. 染色 （1）首先晾干血片，以甲醇固定薄血膜。 应用吉氏染色法，每张玻片约需染液2ml。 （2）配制染色工作液：2ml清洁水（PH7.0-7.2）+4滴吉 氏原液/血片，混匀。须现配现用。 （3）将配好的吉氏染液滴入血片，并均匀分布染色30分钟。然后用 清水轻轻将染液冲洗干净，晾干待检。 4. 镜检 （1）一般只查厚片，薄片仅作为疟原虫分类参考和编号用。 （2）可先以油镜头配合5X低倍目镜镜检，有疑问时可调换10X目镜进行 观察。 （3）检查时应从厚血膜的上缘开始，按下图示意的顺序方向，视野稍叠 视野地查完整个血膜。 厚血膜镜检示意图 5. 结果报告 阴性：报告“未查到MP” 阳性：报告“查到XXXMP” 厚血膜疟原虫镜检“记号”报告法： 全血膜同种同期疟原虫10个以内均记实际数，10个以上但还不到平均1个/视野则记为“少”。 平均每个视野同种同期疟原虫： 1-5个 “+” 如P.f.R 6-10个“++” 如P.f.R 10-100 个“+++” 如P.v.R. G 100个以上“++++” 如P.f.R 注 意： A.抗凝血制作的血片其粘附力差，染色冲洗易于脱落，可 先用生理盐水洗涤2-3次后，再制作厚、薄片。 B.油镜与玻片的清洗： 加清洗液（7份乙醚︰3份无水乙醇）适量，用搽镜纸吸去。 少 3 1 少 2 ++ + +++ + ++++ P.V 与 P.f 鉴别报告 1、发现环状体时，且数量较多，环纤细。像是恶性疟，此时应寻找间日疟的滋养体，如无可判定为恶性疟。 2、发现像是间日疟 原虫时，此时应注意观察全血膜有无恶性疟的配子体，如无可判为间日疟。 。 疟原虫常识与镜检 技术的临床应用 焦作市人民医院检验科 刘 伟 2014.8.12 白居易 一去一不回， 千去千不还。 崖州在何处， 生度鬼门关。 （世界上约1/2的人受威胁，每年死亡人数约200万，其中非洲儿童约100万。云南思茅县1925年约有10万人，疟疾肆虐30年后，余1千人。） 主要内容：  一. 疟原虫的种类与分布 二. 疟原虫生活史与病症概述 三. 疟原虫的形态与镜检技术  四. 制片及染色