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第四章 发酵工艺控制 第一节 发酵生产方法的类型 发酵过程状态： 1、间歇：（1）培养基加入和发酵液放出是一致的； （2）发酵一次一次进行。 2、连续：（1）培养液加入到放出是连续的； （2）培养罐中处于稳定状态。 3、半连续发酵：培养基连续加入发酵液分批或分别放出 I→II→III 整个系统培养液连续加入，但各罐的发酵液分别放出。 一、分批发酵 1、分批发酵的定义 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。 2、分批发酵的特点 微生物所处的环境在发酵过程中不断变化，其物理，化学和生物参数都随时间而变化，是一个不稳定的过程。 3、分批发酵的优缺点 优点： 操作简单； 操作引起染菌的概率低。 不会产生菌种老化和变异等问题 缺点： 非生产时间较长、设备利用率低。 典型的分批发酵工艺流程典型的分批发酵工艺流程 二、补料分批发酵 1、定义 补料分批发酵又称半连续发酵或流加分批发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方式。 2、补料分批发酵的优缺点 优点： 使发酵系统中维持很低的基质浓度； 和连续发酵比、不需要严格的无菌条件； 不会产生菌种老化和变异等问题。 缺点： 存在一定的非生产时间； 和分批发酵比，中途要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。 3、补料分批发酵的类型 按补料方式不同可分为： （1）连续流加 （2）不连续流加 （3）多周期流加 按补料成分的不同可分为： （1）单一组分流加 （2）多组分流加 按控制方式的不同可分为： （1）反馈控制 （2）无反馈控制 三、连续发酵 1、定义 培养基料液连续输入发酵罐，并同时放出含有产品的相同体积发酵液，使发酵罐内料液量维持恒定，微生物在近似恒定状态（恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率）下生长的发酵方式。 连续发酵的优缺点 优点： 能维持低基质浓度； 可以提高设备利用率和单位时间的产量； 便于自动控制。 缺点： 菌种发生变异的可能性较大； 要求严格的无菌条件。 第二节 发酵过程的动力学类型 反应 化学因素 则化学反应动力学 酶→酶反应动力学 发酵：1、速度：表征是什么？几个表征间关系； 2、影响因素：其如何影响，怎样控制这些因素 现主要讨论第1个问题 将培养基灭菌，加入菌种，在一定容器中发酵，将其动态变化画成曲线，此为发酵曲线图 所以影响因素为： a 基质中糖或碳源 b 菌种 c 产物 从此三个因素分析发酵速度。 一、分批发酵 1、分批发酵的定义 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。 2、分批发酵的特点 微生物所处的环境在发酵过程中不断变化，其物理，化学和生物参数都随时间而变化，是一个不稳定的过程。 发酵曲线图 发酵过程分为三大类型 （一）类型I （一）类型I 乳酸发酵 （一）类型I 乳酸发酵 （一）类型I 杆菌肽发酵 （二）类型II （三）类型Ⅲ （三）类型Ⅲ  链霉素发酵（用灰色链霉素生产） 第三节 连续发酵动力学 一、控制方法 1、恒浊法：根据培养液的浊度与菌的浓度成正比，通过一种仪器（如光电效应）控制菌的流量，使菌的浓度保持一致，在此培养基的各种养料是充足过量的，菌都在最大生长速度，菌浓度被控制，适用于动力学类型Ⅰ。 2、恒化法：培养基中有一种可限制菌的生长速度，此为限制性基质，如培养基中糖的含量很低，还可用氨基酸，无机氮等而别的成分不是过量的，培养基的流量一定，这种方法，菌的生长速度不是在最大生长速度，以此控制菌的浓度一定，采用这种方法适于动力学Ⅱ、Ⅲ型。 二、动力学 下面以多罐，开放式（相对于菌体截留的密闭式）混合均匀为例 F 流量 L/h X 菌浓度 g/L S 基质浓度 g/L P 产物浓度 g/L 每一罐流量一样为F 要保持连续发酵系统的稳定 1.菌的情况 流入量十