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第四章 转座子和质粒Transposon and Plasmid 第一节 可移动的遗传单位——转座子 一、转座子的发现： 转座子（transposon，Tn）是可自主复制和移位的基因单位。 在原核生物和真核生物基因组上转座子可以自发的从染色体的一个部位转移到另一个部位或者从一条染色体转移到另一条染色体上。 转座子是基因组突变的主要因素之一。可以引起DNA序列的缺失、倒位和移动。 女孟德尔—巴巴拉．麦克林托克 1932年30岁时进行玉米籽粒颜色的遗传的研究。 1951年在冷泉港会议上提交论文，提出遗传基因可以转移，能从染色体的一个位置跳到另一个位置，甚至从一条染色体跳到另一条染色体上。她把这种基因称为“转座因子” 。 “转座因子” 还具有控制其他其因开闭的作用，因此“转座因子”又可叫做“控制因子”。 玉米转座子 糊粉层颜色基因SG（C基因）——产生紫色 Ds：解离因子，被动性转座子 （在SG附近，关闭SG）——呈黄色 Ac：激活因子，主动性转座子，激活Ds转座 1983获得诺贝尔奖 其境遇与孟德尔类似： 50年代提出超时代的理论， 60年代被证实， 80年代得到认同。 在E.coli中发现了转座因子 乳糖操纵子有三个基因，T，K，E，茎环结构 二、 转座子的分类和结构特征 （一）原核转座子 1、IS序列 2、类IS序列 3、复合转座子 4、TnA家族 （二）真核转座子 1、Ac-Ds转座子 2、逆转座子 （一）原核生物转座子 1、简单转座子 IS序列 最简单的转座子不含有任何宿主基因而常被称为插入序列（insertion sequence，IS），它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。 转座子常常被定位到特定的基因中，造成该基因突变。IS序列都是可以独立存在的单元，带有介导自身移动的蛋白。 简单转座子的结构特点 两端都有短的正向重复序列（direct repeats, DR），长的反向重复序列（inverted repeats,IR）。 1kb左右的编码区，它仅编码和转座有关的转座酶。 IS的茎环结构（发夹） 由于IS中有反向重复序列的存在，因此有IS，那么经变性和复性后，在电镜下可以观察到茎环结构的存在（图23-18）。 2、类转座子（IS-like elements） 结构和IS相似，但不独立存在。而是作为复合转座子两臂的组件。如IS 10R，IR50R和IS 903 复合转座子结构 3、复合式转座子（composite transposon） 某些抗药性基因的转座子 1、其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某个功能基因两端时产生复合转座子。 2、一旦形成复合转座子，IS序列就不能再单独移动，因为它们的功能被修饰了，只能作为复合体移动。 3、复合转座子两端的组件由IS和类IS组成。有的二侧组件相同（Tn903），有的不同（Tn10）。有的方向相同（Tn9），有的方向相反（Tn903）。 4、TnA转座子 长约5kb左右，两端具有IR，而不是IS，中部的编码区不仅编码抗性标记，还编码转座酶和解离酶。 Tn5和TnA Tn5：两端IS序列，IS序列中有转座酶，中间有抗性基因（新霉素磷酸转移酶） TnA：两端IR序列；中间有转座用基因（转座酶和释放酶），还有其他基因（β-半乳糖苷酶）。 （二）真核转座子 真核转座子的情况比较复杂。移动性也比原核转座子大。 有两种类型： 1. 转座子（transposons）：基因移动是从DNA到DNA。如玉米的Ac-Ds家族。 2. 逆转座子（retransposons）or返座子：需要RNA介导转座作用，基因是从DNA到RNA再到DNA。包括非病毒类和病毒类两种类型。 1. 转座子：玉米Ac-Ds转座子 Ac：编码转座酶 Ac-Ds转座后导致供体染色体断裂，染色体发生重排。 Ac受DNA甲基化调节，相应位点甲基化后，其失去转座活性。 其他：果蝇的P，FB。 2. 逆转座子 逆转座子(retrotransposon或retroposon）的转座过程称为反转座作用(retrotransposition)。 除逆转录病毒外，逆转座子可以分成两类： 1.病毒超家族：自己编码反转录酶或整合酶(integrases)进行转录，其转座的机制同反转录病毒相似，但不能像反转录病毒的方式进行传播。 2. 非病毒超家族：自身没有转座酶或整合酶的编码能力，而在细胞内已有的酶系统作用下进行转座。 逆转座子的转座 病毒逆转座子——酵母菌的Ty成分 Ty因子是在不同酵母链的不同位点发现的。“transposon yeast”的缩写。 两端δ成分为334bp的正向重复序列。 Ty因子是独特的转座子，它通过一个RNA中间体而转座。所以是逆转座子。属于病毒超家族。