红细胞检验的基础 2.pptVIP

红细胞检验的基础理论 南昌大学一附院检验科 吕小林 红细胞疾病检验 红细胞减少 红细胞增多 贫血的诊断思路 血液学的一般检验、骨髓及病理学检验 高灵敏度筛查、高特异性确诊试验 结合病史、体征、症状等查明贫血原因 根据原因及发病机制分类 红细胞生成减少:骨髓造血功能障碍、造血原料不足或利用障碍（造血检查，铁代谢检查，叶酸和维生素Ｂ１２检查） 破坏过多：针对溶血性贫血存在的检验，针对红细胞先天民生缺陷检验，针对红细胞获得性缺陷检验． 丢失增加 红细胞检验的基本方法 有关铁指标的检验 血清和红细胞叶酸测定 溶血的检验 红细胞膜缺陷的检验 红细胞酶缺陷的检验 血红蛋白异常的检验 免疫性溶血贫血的检验 血清铁测定 原理：Fe2+ Fe +3 +显色剂，生成有色络合物。 应用评价 1、降低：需求量增加、IDA、慢性失血和 感染等。 2、增高：肝疾病、铁粒幼细胞贫血、AA、 慢性溶血、反复输血等 3、血清经常变化，单项检测意义不大。 血清铁蛋白测定 原理：固相放射免疫法。兔抗人铁蛋白+血清铁蛋白 Ag-Ab复合物+125I标记Ab 标记Ab-Ag-Ab，检测复合物中放射性 算出血清铁蛋白值 应用：能准确反映体内储铁情况。SF减少是诊断IDA敏感方法之一。 1、降低：IDA、慢性失血和 贫血等。 2、增高：肝疾病、铁代谢联性贫血、感染、 恶性肿瘤等 血清总铁结合力测定 原理：在血清中加入已知过量的铁标准液，使之饱和，并检测其中铁，即总铁结合力。再减去原血清铁蛋白中所含的铁，为未饱和铁结合力 应用：增高 IDA和真红细胞增多症等。 降低或正常 肝疾病、溶血性贫 血、感染、恶性肿瘤和肾病综合征等 小细胞低色素性贫血的实验鉴别 IDA红细胞扫描电镜图像： IDA红细胞形态 IDA骨髓病理 正常骨髓外铁外铁（-）~（±）： （+）~（++）： 细胞内铁 第二节 叶酸和维生素B12的检测 一、叶酸测定 放射免疫法 二、维生素B12测定 放射免疫法 三、应用评价 1、降低：巨幼细胞贫血 2、增高：白血病，某些恶性肿瘤等 巨幼细胞贫血血象 巨幼细胞贫血骨髓象 巨幼细胞贫血骨髓象 第三节溶血的检验 红细胞寿命测定 血浆游离血红蛋白检测 血清结合珠蛋白检测 尿含铁血黄素检验 溶血实验室检查 一、RBC寿命测定（最佳） 51Cr同位素标记 正常值：25~32天 应用评价 1、溶血性贫血 红细胞寿命缩短，约14天 2、再生障碍性贫血 约15-29天 红细胞碎片 血浆游离血红蛋白检测 血清结合珠蛋白检测 尿含铁血黄素检验 Hb与Rous异同点 相同点：都反应血管内溶血 不同点： 红细胞膜缺陷的检验 未溶血 开始溶血 完全溶血 成熟红细胞 二、自身溶血试验及纠正试验 正常孵育48小时 0.2-4.0%,加糖 0.1- 0.6%,加ATP 0.1-0.8%。遗传性球形红细胞增多症者，ATP、糖均能纠正；G6PD缺乏者，糖纠正；丙酮酸激酶缺乏者，ATP纠正。 三、红细胞膜三磷酸腺苷活性测定 四、酸化甘油溶血试验 五、高渗冷溶血试验 六、红细胞膜蛋白电泳分析 红细胞酶缺陷的检验 （3） 高铁血红蛋白还原试验 （methemoglobin reduction test） 正常值：定性法（－） 半定量法 还原率75% G6PD缺陷—定性（＋），半定量70%。 　 G6PD 高铁血红蛋白还原酶 G6P NADP 还原型美兰 HbFe3+ 6PG NADPH 氧化型美兰 HbFe2+ NaNO2 红细胞酶缺陷检验 二、变性珠蛋白小体生成试验 三、G6PD荧光斑点试验和活性测定 四、PK荧光斑点试验和活性测定 五、谷胱甘肽还原酶缺陷检测 血红蛋白异常的检验 （2）血红蛋白电泳分析 主要检查有无异常Hb区带 在HbA前出现——快速