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罗氏_非放射性的核酸标记及检测技术
检测DIG标记的核酸 You need: Anti-DIG-Antibody coupled to Alkaline Phosphatase A substrate for Alkaline Phosphatase, Color substrate: NBT/BCIP (membranes and ISH) Chemiluminescent substrates: CSPD or CDP-Star (nylon membranes only) 原位杂交: Anti-DIG-Fluorescein Anti-DIG-Rhodamine 检测DIG标记的核酸 化学发光底物 X-Ray Film - C - G - T - G - A - T - A - G - C - A - C - U - A - T P P Chemiluminescent Detection CSPD / CDP-Star Antibody-Conjugate Labeled-Probe Target DNA Membrane Digoxigenin Alkaline Phosphatase Substrate Substrate 标记和检测试剂盒 DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I (显色法) DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II (化学发光法) DIG Northern Starter Kit DIG DNA Labeling and Detection Kit DIG Nucleic Acid Detection Kit Non-Radioactive NucleicAcid Labeling and Detection 非放射性的核酸标记及检测技术 罗氏诊断产品(上海)有限公司 应用科学部 主要内容 背景知识 非放射性核酸标记方法 非放射性标记的核酸杂交 非放射性核酸检测方法 Isotope Lab Benefits 对使用者健康无影响 更高的灵敏度 compared to radioactivity 更快获得结果 compared to isotopic procedures 探针可以至少保存一年 多种用途 by wide product range 方便操作 of handling Advantages of Non-radioactive Labeling and detection: Detection of Fragile X Hybridization with 32P-labeled probe Target: 10μg human genomic DNA Probe: RPL-labeled Hybr.: Home Brew Exp.: o.n. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Detection of Fragile X Hybridization with DIG-labeled probe Target: 10μg human genomic DNA Probe: PCR labeled Hybr.: Roche protocol Exp.: 20 min 1 2 3 4 5 6 7 8 Non-Radioactive vs. Radioactive (放射性与非放射性比较) 特 征 比 较 放射性标记 地高辛标记 安全:放射性同位素会引起的健康危害使得备受争议,迫切需要采用一种更安全的方法作为替代。 操作:即使是使用很小量的的放射性同位素都需要获得许可证,并在特定的放射性同位素实验室进行,所有的污染废弃物都必须小心的收集和弃置,所有这些都需要耗费人力财力。 半衰期:由于放射性的快速衰减,用高特异活性标记的特定探针只能使用几天。 检测方法:放射性探针通常是采用昂贵的X射线胶片来检测,这种方法比较费时,因为需要较长的暴光时间,并需要特殊的显影仪器。磷影像具有更高的灵敏度,但是更贵,使得很多实验室不能承受。 安全:没有健康和环境的危害,没有不合适的安全限制。 稳定:地高辛标记探针至少可以存放一年,可以预先准
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