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第十四章 蛋白质和核酸
学习要求
1.掌握氨基酸的分类、结构、命名和中、英文缩写。
2.掌握氨基酸的构型和化学性质。
3.掌握肽的结构和命名,肽分子中C―端和N―端的分析方法。
4.了解蛋白质的组成元素,熟悉蛋白质的一级结构及空间结构,掌握蛋白质的化学性质。
5.熟悉核酸的分类、基本结构,掌握核酸分子的碱基及其配对规律
本章要点
氨基酸
1.氨基酸的结构 氨基酸是分子中含有氨基和羧基的化合物。组成蛋白质的氨基酸有20种,均为α-氨基酸L-构型,除甘氨酸外,都是手性分子,除半胱氨酸为R-构型外,其余均为S-构型。
2.氨基酸的分类 根据烃基的不同可把氨基酸分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和杂环氨基酸;根据分子中氨基和羧基的数目,还可将氨基酸分为中性氨基酸、酸性氨基酸和碱性氨基酸。
3.氨基酸的命名 天然氨基酸常使用俗名,也可用中文名称、英文缩写和单字符号来表示。在氨基酸的系统名命法中,是以羧酸为母体,将氨基作为取代基而称为“氨基某酸”,氨基的位次用希腊字母α、β、γ等表示。
4.氨基酸的性质
(1)物理性质:α-氨基酸为无色晶体,熔点较高(200─300℃),在熔化时分解放出二氧化碳。溶解于水,而难溶于乙醇、醚、苯等有机溶剂中。除甘氨酸外,均有旋光性。
(2)氨基酸的化学性质
1).两性电离和等电点:氨基酸分子是两性化合物;与酸、碱可反应生成盐;本身还可生成内盐。氨基酸晶体溶解于纯水中时,可发生酸式电离和碱式电离。中性、酸性氨基酸在纯水中带净负电荷,水溶液显酸性,碱性氨基酸在纯水中,其水溶液呈碱性,氨基酸本身带净正电荷。氨基酸净电荷为零时溶液的pH值称为氨基酸的等电点(isoelectric point)用pI表示。氨基酸的存在形式与溶液pH值的关系可表示如下:等电点时,氨基酸的溶解度最小,可从水溶液中析出,所以可以利用等电点分离提纯氨基酸。
2).显色反应: α-氨基酸与水合茚三酮在水溶液中加热反应能形成蓝紫色化合物,可用于α-氨基酸的定量和定性分析。
3).与HNO2反应: α-氨基酸与亚硝酸作用时定量放出氮气, 该反应可测定氨基酸、蛋白质及肽分子中的自由氨基。
4).脱羧反应:氨基酸在脱羧酶或与氢氧化钡共热可发生脱羧反应,生成少一个碳原子的伯胺。
.成肽反应: 当两分子α-氨基酸受热时,氨基和羧基之间交叉脱水,生成环状的交酰胺(二酮吡嗪),二酮吡嗪在浓盐酸的作用下,可以水解断开一个酰胺键生成二肽。
(二)肽
1. 肽的结构和命名 由氨基酸残基通过肽键(酰胺键)连接而形成的化合物叫做肽。由多个氨基酸形成的肽称为多肽。肽的命名是从N-端开始,由左至右依次将每一个氨酸残基写成“某氨酰”,处于C-端的最后一个氨基酸为母体称为某氨酸。肽的名称也常用中文或英文的缩写符号来表示,符号之间用短线隔开:丙氨酰甘氨酰丝氨酸(丙甘氨丝肽) 丙-甘-丝 或Ala-Gly-Ser。
2.肽链结构测定 可配合使用端基分析( N-端分析、C-端分析)和部分水解的方法来加以确定。
3.活性肽 在生物体内有着重要的功能的游离肽,如:γ-谷胱甘肽、催产素和加压素、神经肽等。
(三)蛋白质
1.蛋白质的元素组成和分类
(1))
(3)蛋白质的沉淀:蛋白质分子在溶液中发生凝聚,并从溶液中析出的现象称为蛋白质的沉淀。常用的方法有:盐析、加脱水剂、加入某些重金属盐和有机酸等。
(4)蛋白质的变性:蛋白质在某些物理因素或化学因素的作用下,蛋白质的性质发生改变的现象称为蛋白质的变性。性质改变后的蛋白质称为变性蛋白质。引起蛋白质变性的物理因素有:加热、加压、激烈的搅拌或振荡、紫外线和超声波等。化学因素有:强酸、强碱、尿素、重金属盐、有机溶剂、生物碱试剂和表面活性剂等。变性有可逆变性和不可逆变性两种。
(5)蛋白质的显色反应
1).缩二脲反应(biure reaction):蛋白质分子中含有许多肽键,因此所有的蛋白质均可与稀硫酸铜碱性溶液反应,呈紫色或紫红色。
2).茚三酮反应(ninhydrin reaction):蛋白质与水合茚三酮共热呈现蓝紫色。茚三酮作为显色剂常用纸层析和电泳法中分离和鉴定蛋白质、多肽和氨基酸。
(四)核酸
1.组成 核酸是由许多核苷酸结合而成的高分子化合物。核酸在酸、碱或酶催化下水解的产物如下:2.核酸的分类 核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA: rRNA、mRNA和tRNA)。
3.核苷和核苷酸的结构及命名
(1)核苷:核核苷是由碱基中嘌呤碱9位氮上的氢或嘧啶碱1位氮上的氢与戊糖1′ 位上的羟基失水所生成的β-N-苷。为区别糖与碱基中原子的编号,规定糖中原子编号1′、2′、3′……。核苷是按组成的碱基与戊糖来命名的
(2)核苷酸:核苷酸是核苷3位或5位的羟基和磷酸所生成的酯。自然界中存在的核苷酸主要是5′-
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