分光光度法测定尿中杀虫脒及对氯邻甲苯胺幻灯片.pptVIP

实验十三 分光光度法测定尿  中杀虫脒及对氯邻甲苯胺 预防医学实验教学中心 一. 目的要求 1.掌握尿中杀虫脒及对氯邻甲苯胺的分光光度测定原理及方法。 2.熟悉分光光度法测定尿中杀虫脒及对氯邻甲苯胺的样品处理方法。 二. 原理 尿中杀虫脒及对氯邻甲苯胺在碱性条件下 用石油醚萃取， 用盐酸溶液从有机相中反萃取，将酸萃取液中和后， 经重氮化、 偶合生成紫红色染料;在552nm波长下比色定量。 三. 实验器材 器材：分光光度计； 10ml具塞比色管； 250ml、150ml分液漏斗； 500聚乙烯塑料瓶。 恒温水浴箱； 尿比重计(1.020)。 四. 方法步骤 1.样品采集 用聚氯乙烯瓶收集接触杀虫脒后的次日晨尿至少200ml，尽快测定比重后，每100ml尿样加入1ml盐酸，于4℃冰箱内存放，至少可保存两周。分析前要将尿样彻底摇匀。 2.样品处理 取100ml尿样于分液漏斗中，加5.0ml氢氧化钠溶液，摇匀，加30ml石油醚，摇2min 静置分层后，弃去尿液， 加15ml饱和氯化钠溶液洗涤石油醚层，洗至醚层无尿色为止，