维生素c含量测定方法..ppt

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2,6一二氯靛酚法 注意事项 (5)若样品中含有Fe2+、Sn2+、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等还原性杂质时,会使结果偏高;Cu2+可与抗坏血酸反应,也干扰测定。有无这些干扰离子可用以下方法检验:取样品提取液、偏磷酸-乙酸溶液各5mL混合均匀,加入0.05%亚甲基蓝水溶液2滴。如亚甲基蓝颜色在5~10s消失,即证明有干扰物存在;此检验对Sn2+无反应,可在另一份10mL的样品溶液中加入1:3盐酸溶液10mL,加0.05%靛胭脂红水溶液5滴,若颜色在5~10s消失;证明有Sn2+或其他干扰性物质存在。为消除上述杂质带来的误差,可采取以下测定方法:取10mL提取液两份,各加入0.1mL10%硫酸铜溶液,在110℃加热10min,冷却后在用染料滴定。有铜存在时,抗坏血酸完全被破坏,从样品滴定值中扣除校正值,即得抗坏血酸含量。 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 (还原型) (氧化型,粉红色) (氧化型) (还原型) + + ==== 2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色,在酸性溶液中呈红色,被还原后红色消失。 2高效液相色谱法测定维生素C 原理 样品中的维生素C经乙二酸溶液(1g/L)迅速提取后,在反相色谱柱上分离测定。 主要仪器及试剂 高效液相色谱仪,紫外检测器等。 乙二酸溶液(1g/L)。 维生素C标准溶液:准确称取维生素C样本2mg与50ml容量瓶中,用乙二醇溶液(1g/L)溶解、定容,摇匀备用,用前配制。 2高效液相色谱法测定维生素C 样品处理 液体样品:取原液5mL与25mL容量瓶中,用乙二醇溶液(1g/L)定容,摇匀后经0.45μm滤膜过滤后待测。 固体样本:称1g样品于研钵中,用5mL乙二醇溶液(1g/L) 迅速研磨,过滤,残渣用乙二醇溶液(1g/L)洗涤,合并提取液于25mL容量瓶中,蒸馏水定容,摇匀后经0.45μm滤膜过滤后待测。 2高效液相色谱法测定维生素C 测定 取5μm标准溶液进行色谱分析,重复进样3次,取标样峰面积的平均值。然后在相同条件下,取5μL样品液进行分析,以相应峰面积计算含量。 色谱条件 色谱柱,μ-Bondapak C18(直径3.9mm*300mm);流动相,H2C2O4(1g/L);流速,1.0mL/min;检测器,紫外245nm;进样量,5μL。 2高效液相色谱法测定维生素C 计算结果 式中: X―样品中维生素C的含量,mg/100g或mg/100mL; m1―标样进样体积中维生素C含量,μg; m2―样品质量(或体积),g或mL; A1―标样峰面积平均值; A2―样品峰面积; V1―样品进样量,μL; V2―样品定容体积,mL。 结束语 总之,维生素C的测定方法很多,各种方法各有特点,常用的滴定法方法简单,但在滴定有色物质终点不易判断,分光光度法操作费时,高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法,方法灵敏,选择性好,有较好的发展前景。毛细管电泳n51是近几年新兴的分析方法,具有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点,但有待于进一步完善。 维生素C含量测定方法综述 摘要 目前研究维生素C测定方法的报道较多,如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等,各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。 关键词 维生素C 滴定法 高效液相色谱法 概述 维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态,起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜,特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量,对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。 测定维生素C常用的方法有2,6-二氯靛酚滴定法、苯肼比色法、荧光法及高效液相色谱法等。2,6-二氯靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸,该法简便,也较灵敏,但特异性差,样品中的其他还原性物质会干扰测定,使测定值偏高,且对深色样液滴定终点不易辨别。苯肼比色法和荧光法测得的都是抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。高效液相色谱法可以同时测得抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的含量,具有干扰少、准确度高、重现性好、灵敏、简便、快速等优点,是上述几种方法中最先进、最可靠的方法。 维生素C的结构式 维生素C:

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