《防治棘胸蛙烂皮病的全灭活疫苗及其制备方法》.doc

防治棘胸蛙烂皮病的全灭活疫苗及其制备方法 技术领域 本发明提供一种具有防治棘胸蛙烂皮病的全灭活疫苗制备方法及其用途。 背景技术 棘胸蛙养殖被认为是目前最具潜力的养殖项目之一，在中国长江以南地区发展较快[1-4]。然而，病害严重影响了其进一步规模化发展。目前，应用免疫学技术防治水生动物细菌性疾病，已越来越多的受到各国水生动物疾病防治工作者的重视[5]。相对于抗生素，研发“高效、实用、低价、安全”的疫苗防治技术逐渐成为国际水产疫病防控的主要问题[6]。 疫苗的免疫方式在很大程度上决定了疫苗的使用与推广。周永灿（2001）等的研究表明在-10℃环境下，保存120～180 d，攻毒试验蛙仍有70%左右的存活率。 （上述2行建议作删除处理。原因是：本发明的实施例给出的也是“注射”。） 好的。 烂皮病对棘胸蛙养殖业危害巨大，但到目前为止，对于该病的致病病原，尚没有统一的定论，目前发现的导致棘胸蛙烂皮病的致病菌主要有葡萄球菌(Staphylococcus)[10]、奇异变形杆菌（Proteus mirabilis)[11]等。 （请问现有技术告知了“不动杆菌”也是致病菌吗？？如有，请具体至告知了哪些“不动杆菌”的具体种类。 即，与本发明所述的3种“不动杆菌”有重合吗？？） 现有文献未告知不动杆菌是棘胸蛙烂皮病的致病菌，因此，与本发明所述的3种“不动杆菌”没有重合 上文中提及的参考文献具体如下 ： 在每个文献后补充其中文译文。注意：人名可仍用英文进行表述。 [1] Yu B G, Ye R H, Zheng Q R, Zhou Y, Chen X, Chen C. The ethogram and activity rhythm of capative Paa spinosa during breeding period. Acta Ecologica Sinica, 2008, 28(12): 6371-6378. 26: 735-750. [2] Zheng R Q, Liu C T. Giant spiny-frog (Paa spinosa) from different populations differ in thermal preference but not in thermal tolerance. Aquatic Ecology, 2010, 44(4): 723-729. [3] Yu B G, Zheng R Q. The advertisement call of the giant spiny frog Paa spinosa. Current Zoology, 2009, 55(6): 411-415. [4] Yu B G, Zheng R Q, Zhou Y, Liu C T. Geographic variation in body size and sexual size dimorphism in the giant-spiny frog Paa spinosa (David, 1875) (Anura: Ranoidae). Journal of Natural History, 2010,?44(27-28): 1729 - 1741. [5] Fu S H. Investigation on the Prevalence of bacterial infectious disease of Rana tigerina rugulosa in Hainan Province from 2003 to 2004 [D]. Nanjing: Nanjing Agricultural University, 2005. [6] Hang X Y. The research on pathogens and vaccine from Streptococcicosis of Bullfrog[D]. Hangzhou: Zhejiang University. 2012. [7] Zhou M, Li Y R, Cao S N, Wang K Y, Li T Y. A immune effects preliminary study of Aeromonas hydrophlia inactivated vaccine against Rana. Fisheries Science, 2009, 28(3): 150-152. [8] Hu C Y, Hong Y J. Bullfrog red legs disease pathogens immunity test. Reservoir Fisheries, 2001, 21(1): 38-39. [9] Zhou Y C, Zhu