转基因与动物克隆课件.ppt

第一步：取妊娠期的6岁母绵羊（Finn Dorset白品种母羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用饥饿法使其进入休眠状态而使全部基因具有活性。 第二步：注射促性腺激素，促使母羊（Sottish Blackface黑面母绵羊）排卵，28~33小时取其未受精卵，快速去核，放入10%FCS、1%FCS和0.5%FCS连续5天，使其进入G0期做受体细胞。 第三步：乳腺细胞与无核卵放入同一培养皿中，在微电流的作用下，将乳腺细胞融入卵中，形成一个含有新的遗传物质的卵细胞。 第四步：新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6天后发育为桑椹胚或囊胚（8~16个细胞）。 第五步：将此早期胚胎移入假孕母羊子宫中，产下多利即为6岁母羊的复制品，也为白色。 多利出生的概率 Cells taken from a six-year-old Finnish Dorset ewe and cultured in a lab. 277 cells then fused with 277 unfertilized eggs (each with the nucleus removed) 29 viable reconstructed eggs survived and were implanted in surrogate Blackface ewes. 1 gave birth to Dolly 0.361% chance at onset, 3.4482% once implanted. In nature between 33-50% of fertilized eggs develop. 从芬兰Dorset山羊取277 个乳腺上皮细胞与277个去核未受精卵细胞融合，得到２９个重建卵细胞，植入代孕黑脸母山羊子宫，产出一头克隆羊Ｄolly。起始获得概率为0.361%, 植入后获得概率为3.4482%。 为何是突破性的工作： 第一，解决了使供体细胞与核受体细胞（去核卵细胞）同步的方法。 第二，解决了用体细胞做核供体与转基因的问题。 这一成果的重要生物学意义 第一，它证明了一个已经完全分化了的动物体细胞仍然保持着当初胚胎细胞的全部遗传信息，并且恢复了失去的全能性形成了完整个体。 第二，多利是世界上首例利用成年哺乳动物体细胞作为供体细胞繁殖的克隆羊，即成体母羊的复制品。它的成功提示我们可以进一步做到，在培育体细胞成为核供体之前，利用“基因靶”技术精确地诱发核基因的遗传改变或精确地植入目的基因，再用选择技术准确地挑选那些产生了令人满意变化的细胞作为核供体，从而生产出基因克隆体。也就是说，我们可以按照人的意志去改选、生产物种。 第三，在现代生物学领域中，沿有任何一项研究成果能够比通过对基因进行有规律地控制而解决更多的问题的先例。多利羊的诞生及生长表明，利用克隆技术复制哺乳类动物的最后技术障碍已被突破，在理论上已成为可能。 克隆技术存在的问题 　理论问题 分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚； 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄。 克隆动物的连续后代是否会累积突变基因。 在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。 实践问题 克隆动物的成功率还很低 生出的部分个体表现出生理或免疫缺陷。 即使是正常发育的“多莉”，也被发现有早衰迹象。 除了以上的理论和技术障碍外，克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用。 The Next Step? Highly unlikely. Attempts at human cloning are viewed very unfavorably in the scientific community. In Future Thank you for your attention! 谢 谢 大 家 ！ * 转基因技术在植物上得到最广泛的应用。它旨在提高各种植物的生产能力、改善品质和提高抗逆性（如抗疾病、抗虫害、抗除草剂或抗旱等） 植物转基因研究的热点是农作物 * 过去的几千年里农作物改良的方式主要是对自然突变产生的优良基因和重组体的选择和利用，通过随机和自然的方式来积累优良基因。遗传学创立后近百年的动植物育种则是采用人工杂交的方法，进行优良基因的重组和外源基因的导入而实现遗传改良。??? 因此，转基因技术与传统技术是一脉相承的，其本质都是通过获得优良基因进行遗传改良。但在基因转移的范围和效率上，转基因技术与传统育种技术有两点重要区别。第一，传统技术一般只能在生物种内个体间实现基因转移，而转基因技术所转移的基因则不受生物体间亲缘关系的限制。第二，传统的杂交和选择技术一般是在生物个体水平上进行，操作对象