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痰找抗酸杆菌影响因素的分析 　　【摘要】 目的 探讨抗酸杆菌检出率的影响因素。 方法 对1119例痰标本用直接涂片法和浓缩集菌法的检出率进行比较。结果 1119份痰液中，清晨痰、夜间痰和及时痰标本的涂片结果差异有统计学意义;干酪痰、粘液痰、血痰和唾液标本的涂片结果差异有统计学意义。 结论 痰标本的性状及留取时间对结核菌检出率影响较大，清晨痰、干酪痰阳性率较高;浓缩集菌法检出率高于直接涂片法。 　　【关键词】痰;结核;抗酸杆菌;涂片; 　　 结核病是危害人类健康的传染病。我国结核病患者数量仍居世界第二，然而在治愈率超过90%的情况下，中国结核病控制瓶颈在于肺结核患者的发现（WHO报告估计发现率为75%）。目前，痰涂片作为结核病常用的筛选方法也是诊断肺结核病及化疗和疗效考核的主要方法。但因为影响因素较多，阳性率很低。所以在检验工作中，如何提高涂片的阳性率是我们密切关注的问题。本实验通过对2011年6月至2013年6月我院各临床科室送检的痰抗酸杆菌涂片标本，根据标本采集时间及标本性状的涂片检出率进行比较，同时采用直接涂片法和浓缩集菌法查抗酸杆菌，并对两种方法的阳性率进行比较，来探讨如何提高痰涂片的阳性率。现将结果报告如下： 　　1 材料与方法 　　1.1 标本来源和采集方法：本试验1119例痰标本均来自我院2011年6月至2013年6月肺结核患者及疑似感染者的痰标本，每位患者分别送检3天的痰标本（及时痰、夜间痰、清晨痰），标本量为3-5ml。 　　1.2 标本分类 　　1.2.1 根据标本送检时间不同分为：及时痰、夜间痰、清晨痰三类。 　　1.2.2 根据痰标本的性状不同分为：干酪痰、粘液痰、血痰和唾液。 　　1.2.3 试剂 萋-尼抗酸染液及罗氏培养基均由贝索生物技术有限公司提供。1：10的84消毒液由江苏爱特福药物保健品有限公司生产。 　　1.3 方法： 　　每份标本先直接涂片一张：用竹棒取痰液干酪样标本约0.05～0.1ml，放在脱脂玻璃三分之二中央处涂成1×2cm大小卵圆形、均匀痰膜，干燥，萋尼染色后镜检。剩余痰标本再进行浓缩集菌法涂片：向剩余痰标本中加入消化液20分钟后，加入等量1：10的84消毒液混匀后倒入具盖离心管中加蒸馏水至40ml，低温离心3000r/min，30分钟后，取沉淀物约0.05～0.1ml，放在脱脂玻璃三分之二中央处涂成1×2cm大小卵圆形、均匀痰膜，置于生物安全柜内自然干燥，萋尼染色后镜检。 　　1.4 镜检结果 报告按照《痰涂片镜检质量保证手册》萋-尼氏染色镜检结果分级报告标准报告结果。 　　1.5 质量控制：科室依据中国结核病防治规划《中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》及《结核病诊断细菌学检验规程》进行涂片的室内和室间质量控制。 　　1.5 统计学方法 计数资料以率表示，组间比较采χ2检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 1119例痰标本中直接涂片法和浓缩集菌法抗酸杆菌阳性率分别为9.7%和22.7%，两种涂片法结果有明显差异（Plt;0.05）。 　　2.2不同留取时间的痰标本涂片阳性检出率的情况。 　　1119例痰标本中浓缩集菌法抗酸杆菌检测阳性为254例，阳性率为22.70%，夜间痰，及时痰的阳性率分别为19.03，11.26;清晨痰检出率最高为37.8%（χ2 =12.82 P0.05）。 　　2.3不同性状痰标本的涂片镜检结果 　　干酪痰，粘液痰，血痰和唾液的检出率分别为63.57%，19.18% ，49.61%，1.17%，干酪痰检出率最高（ χ2 =279 P0.05）。 　　3 讨论 　　3.1目前，痰液检测抗酸杆菌的方法很多，包括涂片法、培养法、PCR法及T-SPORT法等。培养法虽然为结核病诊断的决定性方法，但时间较长，T-SPORT法操作步骤较多且价格比较昂贵，而涂片法简单易行，成本低，常被临床作为结核病的筛选方法，也可以作为临床疗效观察直接有效的方法。 　　3.2直接涂片法阳性率较低，而浓缩集菌法是在直接涂片的基础上，通过胰酶消化进行离心沉沉后涂片镜检，阳性率提高到22.7%，与巩美玲等报道的通过胰酶消化提高阳性率一致。随着越来越多的新发传染病的出现及蔓延，实验室安全问题已开始成为国际关注的焦点，如由继红所报道。有研究表明，不明原因的实验室感染高达80%，一般认为是工作人员吸入了扩散在空气中的病原微生物气溶胶而引起的，吹打、混合溶液极易产生气溶胶，本实验用1：10的84消毒液与痰液混合后离心，取沉淀物涂片减少了气溶胶的形成，从而减少工作人员的感染，可见，84消毒液浓集法不失为简便，快速，检出率高，对操作人员和实验环境都很安全的一种抗酸杆菌浓缩检测方法【7】