第三节动物细胞培养课件.ppt

动物细胞工程 动物细胞工程 常用技术 动物细胞培养 动物组织培养 细胞核移植 体细胞克隆 动物细胞融合 单克隆抗体 4、有关概念 细胞株：原代培养的细胞一般传至10代左右，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 5、动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 温度37℃左右 PH 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 问题： 1.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来？ 2.比较动物细胞培养和植物组织培养所用的培养基的成分. 3.动物细胞培养是否能像植物细胞一样 最终培养成新个体？ （1）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？ 融合形成杂交瘤细胞的特点？ ？ ？ 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 思考： （2）单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技 术手段？ （3）制备过程为何要经过两次筛选？ 细胞膜的流动性； 杂交瘤细胞既能大量繁殖，又可以产生单一抗体 动物细胞融合、动物细胞培养技术 第一次筛选出杂交瘤细胞； 第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞 * * 皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施，10～14天后就要被身体排斥。 如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤？ 离体植物器官、组织或细胞 植物细胞工程常用的技术: 植物组织培养、植物细胞培养 、植物体细胞杂交 温故而知新 悬浮细胞 植物体 愈伤组织 胚状体 脱（去）分化 再分化 （芽、根） 细胞群体 细胞次生 代谢产物 植物体细胞杂交 植物细胞A 植物细胞B 去细胞壁 原生质体融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物组织培养 植物细胞融合 这个过程中涉及的原理是？ 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞与组织培养 1、概念： 是指在体外模拟动物体内环境，将动物的细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其继续生长、增殖并维持原有的结构和功能的技术。目的是获得细胞或细胞代谢产物。 2、选料： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，因为这些细胞生命力旺盛，分裂能力强。 动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 单个细胞 加培养液 剪碎 胰蛋白酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 原代培养：是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。 传代培养：将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中，继续培养，称为传代培养。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 贴壁生长：动物细胞在液体培养基中生长一段时间之后，大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长。 接触抑制:细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时，就停止分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。 动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 细胞株 无限传代 细胞系 传代培养 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质改变 剪碎 胰蛋白酶 保证细胞顺利的生长增殖 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 2、植物组织培养和动物细胞培养的比较 6、动物细胞培养技术的