第九章 基因工程和基因组学-II课件.ppt

编写与制作 刘向东 俞淑红 Copyright(版本3.0) 第九章 基因工程和基因组学 第九章-I 基因组学 第九章-II 基因工程 第九章-II 基因工程 一、基因工程的概念 二、基因工程的四大要素及实施要点 三、细胞工程 一、基因工程的概念 ? 遗传工程（genetic engineering）是七十年代发展起来的一门新技术，它是综合分子生物学与微生物学、分子遗传学等理论和技术建立起来的。 广义的遗传工程：基因工程、细胞工程、染色体工程和细胞器工程。 狭义的遗传工程：基因工程 1 基因工程的概念： 是一种操作，它不是通过一般传统的有性杂交方法，而是采取类似于工程建设的方式，按照预先设计的蓝图，借助于实验室的技术，将某种生物的基因或基因组转移到另一种生物中去，使后者定向地获得新的遗传性状，成为新的类型。这实际上就是目前讲的转基因技术。 2. 基因工程的优越性: 传统杂交只能进行亲缘关系较近的交配（远缘交配失败），无法进行远缘交配（即遗传物质交流），遗传物质交流开始是全方位的，通过人为选择，可以达到目的性状，但工作量大，且容易改变原来的其他优良性状。 但基因工程就不同的，它不但可以进行种间、属间科间遗传物质交流，还可以进行高等、低等，动物与植物间遗传物质交流，同时可以定向而不改变原来的优良性状，所以十分诱人！目前基因工程主要在以下几方面应用： a. 生物制药 b. 遗传病治疗 c. 农业新品种选育 d. 发酵工程 e. 治理环境污染(创造微生物新类型) f. 其他 等 3. 基因工程施工的程序 a. 施工准备材料, 即“目的”基因，载体和工具酶等。 b. 把目的基因与载体结合成重组DNA分子 c. 把重组DNA分子引入受体细胞，即基因转移，建立分子无性繁殖或称克隆。 d. 鉴定筛选转基因系 二、基因工程的四大要素及实施要点 （一）基因的克隆（分离） 1. 鸟枪法（shot gun） 这是基因工程初期使用的方法，曾起很大的作用。目前很少采用，但却在此方法基础上发展用来研究基因的功能等。 鸟枪法具体做法是： DNA 相当于基因大小的片段→与 载体重组 细菌→筛选所需的基因。 （一）基因的克隆（分离） --方法和步骤 ● 从基因库中分离基因 ● 聚合酶链式反应（PCR）扩增基因 ● 人工合成基因 鸟枪法（shot gun） 二、基因工程的四大要素及实施要点 （一）基因的克隆（分离） 1. 鸟枪法（shot gun） 这是基因工程初期使用的方法，曾起很大的作用。目前很少采用，但却在此方法基础上发展用来研究基因的功能等。 鸟枪法具体做法是： DNA 相当于基因大小的片段→与 载体重组 细菌→筛选所需的基因。 2. 化学合成 1970年Khorana首次合成酵母丙氨酸tRNA的基因，1976年合成第一个有生物活性的基因，大肠杆菌酪氨酸tRNA的基因。 基因化学合成首先要了解该基因的核苷酸顺序，然后才能合成。要了解该基因的顺序，通常须将该基因克隆出来，而克隆出来的基因目前可通过更简便方法进行基因合成（克隆），即装入载体，转入细菌中合成或通过其他方法的合成。所以纯粹的基因合成目前少见，除非该基因拿不到！目前化学合成主要用来合成PCR引物等小片段。 3. 从基因库中分离基因 步骤： (1) 构建基因库 (2) 从基因库中筛选目的片段 （3）目的基因的进一步分析与鉴定 3. 从基因库中分离基因 (1) 构建基因库 基因库： 核基因库 染色体库 cDNA库 线粒体库 核基因库 ??????????? 核基因库（genomic library 或genomic bank