第十三章基因工程课件.pptVIP

第十三章基因工程 1.教学目的和要求 （1）掌握基因工程的基本原理 （2）学习基因工程的基本内容和技术 （3）掌握内切酶、连接酶的功能 2.教学重点 （1）掌握基因工程的基本原理和技术 （2）学习目的DNA的分离 第十三章基因工程（Gene Engineering） 在各种酶的作用下，将目的基因的DNA分子与载体DNA分子相连接，形成重组的DNA分子，以一定的方式导入原无该类分子的宿主细胞，并使宿主生物变为自然界原来没有并能连续传代的新生物。 要点： 供体、载体、受体 基因工程分狭义（上游）：重组、克隆、表达的设计和构建。 广义（下游）：表达工程菌的发酵培养和产物的纯化。 目的：DNA扩增，外源基因表达产物，表达调控，改造生物遗传特性等。 基因工程 限制性内切酶和载体是基因工程的众多理论与技术基础中最重要的基石。 基因工程的基本步骤可概括为： 目的基因的获得(基因克隆)； 目的基因与载体连接(DNA分子重组)； 重组DNA分子导入受体； 转化子的筛选、鉴定。 限制性内切酶与DNA连接酶 细菌细胞内特异性降解外源(异源)核酸分子的核酸酶。其作用： 特异性降解异源DNA分子(甲基化修饰差异)； I类限制酶随机切割双链DNA分子，II类限制酶识别、切割特殊的回文(对称)序列； II类限制酶交错切割DNA双链，产生粘性单链末端。 来源不同、具有相同粘性末端DNA片段在DNA连接酶的作用