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- 2017-01-03 发布于北京
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取HepG2细胞消化制备细胞悬液接种至60mm培养皿中培养,对照组:按每皿2000个细胞接种于60mm培养皿中培养,VPA 0.5mmol/L组:按每皿2000个细胞接种于60mm培养皿中过夜,更换含VPA 0.5mmol/l继续培养24h后换为新鲜培养液。 IR组和IR+VPA 0.5mmol/L组:按每皿2000、10000、20000个细胞接种于60mm培养皿中过夜,IR+VPA 0.5mmol/L组更换为含VPA 0.5mmol/L继续培养24h随后2组细胞分别给予3个剂量IR照射:2Gy(每皿2000个细胞)、4Gy(每皿10000个细胞)和6Gy(每皿20000个细胞)。上述4个处理组均同时设3个平行对照,培养10d当培养皿中出现肉眼可见克隆时用20%乙醇溶解稀释结晶紫至0.1%,用该结晶紫溶液固定并染色细胞克隆30min后用去离子水冲洗3次置空气中干燥,倒置显微镜下计数≥50个细胞的克隆数,结果取平均值,并计算克隆形成率: 克隆形成率(%)= 每皿克隆数/ 每皿接种细胞数×100%。
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