云南省西盟佤族自治县第一中学初中生物实验讲义 实验十一 单因子杂交实.docVIP

云南省西盟佤族自治县第一中学初中生物实验讲义 实验十一 单因子杂交实验 单因子杂交实验是验证孟德尔分离定律的实验，也是遗传学的最基本的实验。可以选用方便的植物或动物材料做实验，例如豌豆、玉米、果蝇等。但是，实验材料要从纯系开始，让纯系间进行杂交，获得F1，再使F1自交或兄妹交配获得F2，也可以进行F1与隐性亲本杂交（回交或测交）获得Ft。记录分离群体的数据并做适合性检验。 一、实验目的 1．验证和进一步理解孟德尔的分离规律。 2．掌握果蝇杂交实验技术。 3．学会单因子杂交实验的调查统计和分析方法。 二、实验原理 一对基因在杂合状态时仍保持相对的独立性，而在配子形成时又彼此分开分别进入不同的配子中。理论上配子分离比例为1：1，F2世代基因型分离比例为1：2：1，若完全显性遗传，F2 表现型分离比例是3：1，这就是分离定律。 三、实验材料、仪器和药品 1．实验材料 野生型果蝇（长翅），残翅果蝇。玉米杂交果穗。 2．仪器和药品 解剖显微镜、麻醉瓶、白磁板、解剖针、毛笔、镊子、乙醚。 四、实验内容与步骤 1．以果蝇为实验材料 选残翅果蝇（v/v）和野生型果蝇（+/+）为亲本，进行杂交，正、反交都可以。但母体一定要选用处女蝇（为什么？），培养两瓶，每瓶5～6对，记作P. 7～8天后，移去亲本果蝇。待F1成虫出来后，观察子代（F1）翅膀是否全是长翅。（为什么？ ） 取5～6对F1果蝇放在一个新培养瓶中，这里无须处女蝇（为什么？）7～8天后移去F1。在第二代（F2）果蝇出现后，鉴定有多少是野生型，有多少是残翅型。连续统计7～8天，把调查数据记入表格。被统计过的果蝇立即放到死蝇收集瓶中。 2．以玉米为实验材料 玉米胚乳性状，如非甜与甜（Su/su）、有色与无色（C/c）、非糯与糯（Wx/wx）皆表现单基因遗传。例如隐性甜胚乳（susu）性状的个体由显性非甜（SuSu）玉米授粉，由于花粉直感作用，当代就得到非甜的籽粒（Susu）,因此雌果穗的子粒性状为F1性状，它自交所得子粒为F2 ，则得非甜粒：甜粒=3：1的分离。F1与隐性亲本杂交（测交），则得非甜粒：甜粒=1：1的分离。 计数F1（Susu）玉米自交果穗（F2）结果填入表格，再进行X 2检验，也可用F1（Susu）×隐性（susu）测交的果穗进行统计。 五、结果统计及分析 经调查，把每组的实际观察值填入表格，再按理论比例计算各组理论数、偏差和卡平方值（Χ2），查表得出概率值，最后，依据适合性检验原理，推断实际观察结果所来自总体的分离是否符合理论比例。（注：Χ20.05=3.84） 果蝇残翅×长翅F2 项目 长翅 残翅 合计 实际观察数（O） 理论数（按3：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米有色×无色F2 项目 有色 无色 合计 实际观察数（O） 理论数（按3：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米有色×无色F1 项目 有色 无色 合计 实际观察数（O） 理论数（按1：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米非甜×甜F2 项目 非甜 甜 合计 实际观察数（O） 理论数（按3：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米非甜×甜F1 项目 非甜 甜 合计 实际观察数（O） 理论数（按1：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米非糯×糯F2 项目 非糯 糯 合计 实际观察数（O） 理论数（按3：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 玉米非糯×糯F1 项目 非糯 糯 合计 实际观察数（O） 理论数（按1：1）（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E Χ2=∑[（O-E）2/E] p= 分析： 六、拓展试验 你可以用豌豆、水稻等二倍体植物进行有性杂交和自交或回交来验证分离定律，也可以用纯种动物进行杂交实验，来验证分离定律。请自行设计试验方案。