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Recombinant Human Interleukin-2 人白细胞粉 重组人白细胞介素-2 主要内容 一、基本信息 二、生产制备 三、药物信息 四、注意事项 五、发展前景 一、基本信息 为多肽类免疫增强剂，是一种淋巴因子。 刺激B细胞增殖分化和分泌抗体。 诱导干扰素和多种细胞因子的分泌 用于肿瘤辅助治疗和癌性胸、腹水的治疗。 也可各种自身免疫病的治疗。 对乙型肝炎、麻风病、肺结核、白色念珠菌感染等具有一定的治疗作用。 二、生产制备 生产制备的方式主要有两种： 1、传统工艺制备 2、基因工程制备 其中以第二种方法为主 传统工艺流程 鸡瘟病毒，PHA,培养液 [启动诱生] 37℃ 诱生白细 胞培养液 [灭活病毒，分离],HCl,NaOH pH = 2~2.5,pH = 7.2~7.4,离心 上清液 35%硫酸铵 4 ℃，24h，离心 上清液 85%硫酸铵 4 ℃，24h，离心 沉淀 10mmol/LPBS透析 pH = 6.5，24h 透析内液 [亲和层析] 上Sepharose柱 pH = 6.5 亲和载体I [洗涤] 0.4mol/LNaCl，PBS pH = 6.5 亲和载体Ⅱ [吸收] 1.0mol/LNaCl,PBS透析 pH = 6.5 IL-2组分 [凝胶层析] 上Utrogel柱 pH = 6.5 凝胶载体 0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG 2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸 pH = 7.6 IL-2 基因工程制备流程 IL-2 cDNA 文库的构建 IL-2表达 利用mRNA杂交筛选 IL-2 cDNA克隆 与质粒载体pLY-4连接，并转入大肠杆菌 纯化的IL-2 制备包涵体，并用凝胶过滤层析纯化 cDNA文库的构建 IL-2mRNA 逆转录酶 逆转录成单链cDNA 末端脱氧核苷酸转移酶 cDNA末端连接dCMP残基，寡聚（dG）12~18为引物 DNA聚合酶I 双链 cDNA 蔗糖密度梯度离心 cDNA片段 G-C加尾法 插入到pBR322质粒的PstI位点 重组质 粒转化大肠杆菌 得到IL-2 cDNA文库 三、药物信息 药典中有以下三种药物含有重组人白细胞素介素-2： 注射用重组人白细胞介素-2 重组人白细胞介素-2注射液 注射用重组人白细胞介素-2（ Ⅰ ） 注射用重组人白细胞介素-2 高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白细胞介素-2冻干制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。 外观为白色或者微黄色疏松体，加灭菌注射水后迅速溶解为澄明液体。 重组人白细胞介素-2注射液 高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白细胞介素-2制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。 外观为无色或者微黄色澄明液体。 注射用重组人白细胞介素-2（ Ⅰ ） 高效表达人白细胞介素-2 （ Ⅰ ）基因的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白细胞介素-2 （ Ⅰ ）冻干制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。 外观为白色或者微黄色疏松体，加灭菌注射水后迅速溶解为澄明液体。 人白细胞介素-2 （ Ⅰ ）基因是人白细胞介素-2基因序列中原125位编码半胱氨酸的序列突变为编码丝氨酸的序列后的突变基因 用法用量 静脉滴注：10万一80万国际单位； 皮下注射：50万—100万国际单位； 胸腹腔注射：30万—l00万国际单位； 介入动脉灌注：40万—l00万国际单位； 肿瘤灶局部给药：根据瘤体大小决定用药剂量。一般剂量为一次20万国际单位(IU)。 注：药物采用氯化钠溶解。 四、注意事项 注意事项： 各种不良反应中最常见的是发热、寒战，而且与用药剂量有关； 个别患者可出现恶心、呕吐、类感冒症状； 皮下注射者局部可出现红肿、硬结、疼痛； 使用较大剂量时，可能会引起毛细血管渗漏综合征，表现为低血压、末梢水肿等。 四、注意事项 禁忌： 1、对本品成份有过敏史的病人。 2、高热、严重心脏病、低血压者 严重心肾功能不全者、肺功能异常或进行过器官移植者。 3、重组人白细胞介素-2既往用药史中出现过与之相关的毒性反应。 五、发展前景 目前研究是对其在用药前进行化学修饰，主要采用PEG修饰： 具体有三聚氯氰活MPEG修饰 MPEG 硝基苯基碳酸盐修饰。 修饰物和rhlu-2的投入比、反应环境的PH、修饰反应的时间、1%PEG4000的加入都会影响到修饰产物的活性。 五、发展前景 修饰后的产物经过疏水层析和凝胶过滤即可被提纯。 目前已经证明rhIL-2 经不同的 PEG 化处理后，其循环半衰期均有不同程度的提高， 其水溶性也得到极大提高，可不用