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survivin， VEGF和PCNA在人脑胶质瘤中的表达及意义 　　【摘 要】目的：探讨survivin， VEGF和PCNA在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法：应用免疫组化SP法检测42例胶质瘤和15例正常脑组织标本中survivin， VEGF和PCNA蛋白的表达。结果：survivin， VEGF和PCNA蛋白在正常脑组织中均无表达，三者在脑胶质瘤中的阳性率分别为54.76%（23/42）、57.14%（24/42）、61.90%（26/42），脑胶质瘤中的表达率均显著高于正常脑组织（p0.01）；胶质瘤中三者表达呈直线趋势，两两相关。结论：survivin， VEGF和PCNA蛋白表达与脑胶质瘤的发生、发展有关；在胶质瘤的发生、发展过程中可能存在VEGF， survivin和PCNA因子调控通路。联合检测脑胶质瘤中survivin， VEGF和PCNA蛋白表达，可能进一步阐明胶质瘤的发生发展机制，更有利于对脑胶质瘤的恶性生物学行为进行评价和判断，还可能为胶质瘤的手术治疗、靶向治疗及临床评预后评价提供新思路。 　　【关键词】胶质瘤；survivin；VEGF；PCNA 　　【中图分类号】R322.81 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）11—0012—01 　　1材料与方法 　　1.1组织标本：标本选自于2005年3月-20013年7月在唐河县人民医院神经外科神经外科住院手术治疗，并经病理诊断为胶质瘤，病理科保存完好的石蜡包埋的标本。共42例患者。 　　1.2实验方法：免疫组化的实验步骤按链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接（SP）法说明书进行。即用型兔抗人survivin、VEGF、PCNA、多克隆抗体（一抗）均购自北京博奥森生物技术有限公司。用已知阳性的组织做阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照，以除外假阳性结果。 　　1.3结果判定：survivin蛋白阳性细胞为细胞浆或细胞核中出现淡黄色，棕黄色或棕褐色的颗粒，VEGF蛋白阳性细胞为细胞浆中出现淡黄色，棕黄色或棕褐色的颗粒，PCNA定位于细胞核，肿瘤细胞呈棕褐色为阳性。每例切片在400倍视野下随机选取最高密度区域的5个不重复视野，每个视野计数200个细胞共1000个细胞，分别计数每个视野细胞总数（N）及阳性染色细胞数（n），求出每例标本的阳性指数（LI）。根据肿瘤细胞数量，阳性程度分级：survivin阳性细胞数≤4%为阴性（-），5%-25%为弱阳性（+），26%-50%为阳性（++），≥50%为强阳性（+++）；VEGF阳性细胞数≤1%为阴性（-），1%-10%为弱阳性（+），11%-30%为阳性（++），≥31%为强阳性（+++）[1]。PCNA分级同survivin。 　　1.4统计学处理：研究资料采用Excel 2003建数据库，结果以平均数±标准差表示，采用SPSS15.0统计软件包进行统计学处理，选择精确模块：两组间阳性率的比较采用卡方检验；两组间阳性指数（LI）均值的比较采用t检验；两因素间的相关关系分析采用直线相关。取α0.05，差异有统计学意义，α0.01差异有显著统计学意义。 　　2结果： 　　2.1 survivin蛋白中的表达：正常脑组织中survivin蛋白无表达；42例胶质瘤组织中，23例表达阳性，阳性率为54.76%；脑胶质瘤中的表达率高于正常脑组织（p0.01）。在23例Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本中阴性14例、弱阳性4例、阳性4例、强阳性1例，阳性率为39.13%（9/23），LI值为（9.52±14.37）%，在19例Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本中阴性5例、弱阳性3例、阳性7例、强阳性4例，阳性率为73.68%（14/19），LI值为（26.11±22.16）%，低度恶性（WHOⅠ+Ⅱ）组胶质瘤阳性指数均值低于高度恶性（WHOⅢ+Ⅳ）组。 　　2.2 VEGF蛋白的表达：正常脑组织中VEGF蛋白无表达；42例胶质瘤组织中，24例表达阳性，阳性率为57.14%；在脑胶质瘤中的表达率高于正常脑组织（p0.01）。在23例Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本中阴性13例、弱阳性5例、阳性4例、强阳性1例，阳性率为43.48%（10/23），LI值为（5.87±9.14）%，在19例Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本中阴性5例、弱阳性3例、阳性5例、强阳性6例，阳性率为73.68%（14/19），LI值为（16.89±15.94）%，低度恶性（WHOⅠ+Ⅱ）组胶质瘤的表达率和阳性指数均值低于高度恶性（WHOⅢ+Ⅳ）组。 　　2.3 PCNA蛋白的表达：正常脑组织中PCNA蛋白无表达；42例胶质瘤组织中，26例表达阳性，阳性率为61.90%；在脑胶质瘤中的表达率高于正常脑组织（p0.01）。在23例Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本中阴性12例、弱阳