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无菌室空气污染情况的检验0 r* j8 X% u2 c: |1 V f# l* N. t8 H U1 i$ B% j2 ^/ [# j* Y# i% n定期检验无菌室空气污染情况，对改进灭菌措施，提高成品率是非常必要的。常用方法步骤如下：; ~2 I7 ~( D+ [ l2 z z P$ S L7 I- Q1．平板检验法：用常规培养基，倒成平板，收入接种室。在事先熏蒸好的接种室，使用前半小时或1小时把供试的培养皿或试管打开，按预定时间盖好培养皿或试管。留对照皿不打开。然后一起放入30℃的温箱中培养48小时，检查有无菌殖生长，并由菌落形态，判断杂菌种类。一般要求平板培养基开盖5分钟，菌落不超过3个；叙面培养基开塞 30分钟者，以不出现菌落为合格。 Z3 X* ]1 i; l* G! D l0 n+ C2 d. x# o# {/ _ 2．斜面检验法：将常用的琼脂斜面培养基各取二管，放入接种室，按无菌操作各将其中的一管的棉塞取出，放在灭菌的培养皿内。经过一定时间后，再将棉塞通过火焰，塞回试管，连同对照一起培养。经48小时后，检验有无杂菌生长。和上边方法同。9 U; `( Q; A5 o* ~% M- m, x q8 K n4 ?. u; t9 f- s 3．空气污染情况检验：在接种过程中，人员的出过、器材的搬放、接种操作的动作等原因造成空气污染，检验方法是在准备工作结束后，接种操作开始时，按上述方法打开培养皿盖子或试管塞，经5分钟、30分钟或直到工作结束时再盖好，以检验在不同的使用时间内，空气污染的程度。 o$ f U/ G# g! k a M5 d2 D1 M2 r5 [ J( r4 }如霉菌较多时；可先用5％石炭酸全面喷射后，再用甲醛熏蒸。如细菌较多时，可采取用乳酸和甲醛交替熏蒸的办法加以杀灭。 无菌室标准化规程及验收- Q9 p S8 L Q L2 _ d* F, S! A j U y1 X9 I8 K; @* s+ O, R l+ _* p6 M7 j; m/ f8 s5 H 1.目的本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。( F, ]1 e1 u. N1 }. C* H+ H! W! x D, m. J) Z r# j2.适用范围 生测实验室5 D4 ^6 a0 R V, v( a0 _- ]0 R: r. P9 C# ~. h- F# i3 I# _6 }3.责任者 QC主管生测员9 ?* ~3 b r7 O- d! T3 { U( a 4.定义 无, B S5 [, p$ ?7 {- T6 S: Q5 b+ _; T8 I 5.安全注意事项严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。: Y- M% M- a `) N( o0 S4 ^ ^$ i6 J x 6.规程 D+ ]7 l0 r$ r- B9 ?# V; ?- o( s9 t$ b1 ~ 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。5 p* U8 v# G9 h6 I M% h2 X3 \; m* Q6 _2 G7 v; R8 a+ F6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。: N0 `1 f( m- t5 w/ ? y) ]0 h/ f! A8 k7 m) q- t! T6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。( L2 n0 p0 h% U$ a* L) `0 u+ |( |* x a- c3 U/ G 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。2 }4 {# w3 P; U a: q$ m T9 p R/ _ P# n S7 D 6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。5 Q L) {/ l( v* _2 ]# \; {( }, b ^, A O6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。) M+ s r6 U6 t* d6 s+ R7 A; F7 V4 l6 s( n6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。* w! M$ G p! s( e6 ^$ j% h/ P- S2 S6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。: I3 l4