荧光定量PCR检测HCV核酸提取法临床价值分析.docVIP

荧光定量PCR检测HCV核酸提取法临床价值分析 　　【摘要】目的使用RQPCR比较氯仿异丙醇法和核酸分离柱法提取HCV RNA的临床价值。方法分别用两种核酸提取法提取相同患者的HCV RNA后，采用RQPCR技术检测HCV RNA含量，对两种方法的提取效率和重复性进行对比。结果两种方法均能较好地提取RNA，且提取效率相近（P005），但是核酸分离柱法在重复性上更加优于氯仿异丙醇法。结论两种方法均可被临床采纳，但是核酸分离柱法重复性更高，且毒性低，值得推广。 　　【关键词】 　　荧光定量聚合酶链反应；丙型肝炎病毒核酸；核酸分离柱；氯仿异丙醇提取法 　　Analysis of clinical value of HCV nucleic acid extraction detected by fluorescent quantitative polymerase chain reaction 　　ZHANG Weimin， GONG wenboShenzhen People’s Hospital， Guangdong 518020， China 　　【Abstract】Objective 　　To compare the extraction efficiency and clinical value of the two methods of HCVnuclear acid extraction，which is isopropanolchloroform nuclear acid extraction and separation column nuclear acid extraction， by the detection of fluorescence quantitative PCR MethodsAfter extracting RNA of HCV with two methods，which was isopropanolchloroform nuclear acid extraction and separation column nuclear acid extraction， fluorescence quantitative PCR was used to detect the content of the RNA then compared the extraction efficiency and repeatability of the two methods ResultsBoth of two methods could effectively extract RNA There was no significant difference in the extraction efficiency （P005）， but when come to the repeatability， the method which used nucleic acid separation column showed significant advantage ConclusionThe two methods are similar and both can be adopted on clinical appli cation， but the method used nucleic acid separation column is more excellent on the repeatability. 　　【Key words】 　　Fluorescence quantitative polymerase chain reaction； Hepatitis C virus RNA； Nucleic acid separation column； Isopropanolchloroform nuclear acid extraction 　　作者单位：518020曁南大学第二附属医院/深圳市人民医院检验科 　　通讯作者：谢亚琴 　　丙肝是因感染丙型肝炎病毒（hepatitis C virus， HCV）引起的病毒性肝炎，主要是通过母婴、血液和体液传播[1]。丙肝病理机制主要为免疫病理损害，因其易发展为肝硬化或肝癌，临床对此疾病重视程度很高。HCV属黄病毒科，拥有单股正链RNA[2]，临床上主要以HCV RNA含量作为丙肝的确诊实验，而常选用的丙型肝炎病毒RNA荧光定量检测试剂盒中上核酸的提取方法通常有两种，即氯仿异丙醇法和核酸分离柱法。现对两种核酸提取法结果和重复性进行对比，其结果如下。 　　1资料与方法 　　11一般资料 　　标本来源为本院2011年3月至2012年6