金魔芋炭疽病生物学特性研究.ppt

金魔芋炭疽病生物学特性研究 姓名：和丽舒 指导教师：余磊 农学院园艺（1）班 学号：201022010142 目录 1 2 3 4 前言 材料与方法 结果分析 讨论 第一章 前言 魔芋——又名蒟蒻，是天南星目，天南星科，魔芋属的一种生长在海拔250—2500米的山间多年生草本植物。由于魔芋含有十六种氨基酸，十种矿物质微量元素和丰富的食物纤维，对防治糖尿病,高血压有特效；魔芋低热、低脂、低糖，对预防和治疗结肠癌、乳腺癌、肥胖症的人群可以说是一种上等的既饱口福、又治病健体的食品，还可以防治多种肠胃消化系统的多种常见慢性疾病，所以魔芋具有十分高的药用价值。 金魔芋——新发现的一个特有珠芽魔芋类品种，其葡甘聚糖含量远高于花魔芋、白魔芋及其它珠芽类魔芋品种如红魔芋等，具有很好的加工和推广价值。 金魔芋 第一章 前言 第一章 前言 炭疽病——发病初期，在叶片上呈现圆形、椭圆形红褐色小斑点，后期扩展成深褐色圆形病斑，中央则由灰褐色转为灰白色，最后病斑转为黑褐色，后期病斑穿孔，病斑多时融合成片导致叶片干枯，病叶易脱落。 第二章 材料与方法 2.1 金魔芋炭疽病害植株来源 染病的金魔芋植株叶片来自云南省德宏州，经采集后带回云南省昆明学院农学院实验室中冷藏保存，待用。 2.2 病原菌的分离和纯化 在发病的魔芋叶片病健交界处切取3cm×3cm的组织块，经75%乙醇处理1min后，用0.1%的升汞表面消毒3min，在灭菌水中漂洗三次，每次漂洗时间为3min，最后除去组织表面多余水分，置于马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA）平板上，于30℃培养72h后挑取菌落边缘菌丝进行纯化。 第二章 材料与方法 第二章 材料与方法 2.3 致病性测定 PSA上培养5d的菌落切成长10mm，宽5mm的菌块，选健康金魔芋植株的叶片，用70%的酒精进行表明消毒后，采用针刺法进行接种。在叶片上接种带菌PSA培养 基，采用湿润的脱脂棉保湿，对照叶片滴灭菌水，每处理三次重复。接种的叶 片套袋保湿，并将植株置于25℃~30℃的温室中，每隔2d观察发病情况。 2.4病原菌形态学特征观察 取出纯化后的菌种，在无菌操作台中用肉眼观察、描述菌落形态。在培养基上挑取病原菌菌丝做徒手切片，在光学显微镜下观察分生孢子及其分生孢子器的形态特征，并测量其大小［4］。根据病原菌的产孢特征及其在PSA上的形态特征，参照文献《真菌鉴定手册》［5］进行病菌鉴定。 第二章 材料与方法 2.5 病原菌生物学特性研究 2.5.1 不同培养基对病原菌生长的影响 供试培养基为马铃薯蔗糖培养基、水琼脂培养基、胡萝卜培养基、燕麦片培养基、番茄培养基，取上述培养的菌落，边缘用直径为5mm的打孔器打取边缘长势一致的菌落接种在不同的PSA平板上，每个处理设置4各重复，30℃下黑暗培养，4d后用十字交叉法测量菌落的直径并观察记录菌落的生长势 PSA培养基——用天平称取洗净的去皮马铃薯20g，切碎后放入锅中煮沸30min，将过滤后的溶液定容至100ml，加入2g琼脂，2g蔗糖，搅拌均匀后移入锥形瓶中，包扎好后放入灭菌锅121℃，灭菌40min。待温度适宜后取出，在超级工作台内倒入培养皿中，待冷凝备用。 水琼脂培养基——在100ml水中加入2g琼脂，搅拌均匀后移入锥形瓶中，用报纸包好瓶口，再用橡皮筋扎好。放入灭菌锅中121℃，灭菌40min。待温度适宜后取出，在超级工作台内倒入培养皿中，待冷凝备用。 第二章 材料与方法 胡萝卜培养基——用天平秤取洗净的胡萝卜20g，切碎后放入锅中煮沸30min，将过滤后的溶液定容至100ml，加入2g琼脂，搅拌均匀后移入锥形瓶中，包扎好后放入灭菌锅121℃，灭菌40min。待温度适宜后取出，在超级工作台内倒入培养皿中，待冷凝备用。 燕麦培养基——天平秤取3g燕麦，放入锅中加水煮沸30min，将其过滤后定容至100ml，加入2g琼脂，搅拌均匀后移入锥形瓶中，包扎好后放入灭菌锅121℃，灭菌40min。待温度适宜后取出，在超级工作台内倒入培养皿中，待冷凝备用。 番茄培养基——番茄捣碎后取其汁液20g，加水定容至100ml，加入琼脂2g，搅拌均匀后移入锥形瓶中，包扎好后放入灭菌锅121℃，灭菌40min。待温度适宜后取出，在超级工作台内倒入培养皿中，待冷凝备用。 第二章 材料与方法 2.5.2 不同 pH 对病原菌生长的影响 以真菌的生理培养基为基础培养基，加入HCL（1mol/L）和NaOH（1mol/L）将培养基分别调成1、2、3、4、5、6、7、8、9、10不同的ph值［7］，取上述培养的菌落，边缘用直径为5mm的打孔器打取边缘长